低聚葡萄籽原花青素對DOCA-高鹽誘導(dǎo)的小鼠心血管重構(gòu)的影響及機制研究.pdf

1、目的：心血管重構(gòu)是高血壓重要的靶器官損傷,是導(dǎo)致許多心血管疾病發(fā)病率和死亡率升高的獨立風(fēng)險因素,深入探討心血管重構(gòu)的發(fā)生機制、提出新的防治策略仍是國內(nèi)外心血管領(lǐng)域的一個研究熱點。本實驗旨在通過皮下注射去氧皮質(zhì)酮(deoxycorticosteroneacetate,DOCA)同時予高鹽飲水復(fù)制DOCA-鹽高血壓心血管重構(gòu)小鼠模型,探討低聚葡萄籽原花青素對高血壓心血管重構(gòu)實驗治療作用及其可能的抗氧化應(yīng)激信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制。
　　方法：皮下

2、注射DOCA同時予高鹽飲水復(fù)制DOCA-鹽高血壓小鼠模型。雄性昆明小鼠64只,體重23-26g,結(jié)扎腎動脈并切除左側(cè)腎臟,術(shù)后隨機分為8組:雙腎對照組、單腎對照組、DOCA-鹽高血壓模型組、低聚葡萄籽原花青素(oligomericgrapeseedproanthocyanidins,GSP)低劑量組(65mg/kg)、GSP中劑量組(130mg/kg)、GSP高劑量組(195mg/kg)、氨氯地平組(5mg/kg)和Tempol組(60

3、mg/kg)。模型組、GSP各劑量組、氨氯地平組和Tempol組皮下注射DOCA(150mg/kg/周),每周2次,按0.025ml/10g/次給藥,同時飲含1％氯化鈉及0.2%氯化鉀的鹽水,持續(xù)4wk。GSP各劑量組、氨氯地平組和Tempol組分別予藥物灌胃,每天1次,灌胃給藥容積0.1ml/10g,對照組和模型組給予等容量純水灌胃。實驗結(jié)束后計算小鼠心臟重量指數(shù)以及腎臟重量指數(shù),HE(hematoxylineosin)染色和/或V-

4、G(VanGieson)染色觀察心臟、胸主動脈及腎臟病理形態(tài)學(xué)改變,離體血管環(huán)灌流方法觀察胸主動脈環(huán)對乙酰膽堿(acetylcholinechloride,ACh)誘導(dǎo)的內(nèi)皮依賴性血管舒張用的影響,比色法測定血清中超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和一氧化氮(nitricoxide,NO)含量、心肌羥脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,W

5、esternBlot檢測心肌組織中凋亡信號調(diào)節(jié)激酶-1(apotosissignalregulationkinase-1,ASK-1)、核因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)和環(huán)氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)的蛋白表達水平。
　　結(jié)果：與單腎對照組相比,DOCA-鹽型高血壓模型組小鼠心重指數(shù)、腎重指數(shù)、心肌細(xì)胞橫截面積(cross-sectionalarea,CSA)、心肌膠原纖維

6、、腎小球面積明顯升高,胸主動脈中膜厚度明顯增大,胸主動脈環(huán)對ACh引發(fā)的舒張作用明顯減弱,血清MDA含量升高,SOD活性降低,NO含量減少,心肌組織Hyp含量以及凋亡信號調(diào)節(jié)激酶-1(ASK-1)、核因子-κB(NF-κB)和環(huán)氧化酶-2(COX-2)的表達明顯上調(diào)。與模型組相比,GSP低、中、高劑量、氨氯地平和Tempol能明顯抑制小鼠心重指數(shù)、腎重指數(shù)、CSA、胸主動脈中膜厚度以及腎小球面積的增加,心肌膠原沉積減少,胸主動脈環(huán)對AC