對乙酰氨基酚對胰蛋白酶、牛血紅蛋白和過氧化氫酶毒性的研究.pdf

1、對乙酰氨基酚是世界上廣泛使用的解熱鎮(zhèn)痛藥，按照標(biāo)準(zhǔn)劑量服用對乙酰氨基酚是相當(dāng)安全的，但是長期服用、混合服用和酒后服用等不當(dāng)?shù)姆梅绞絼t會造成肝衰竭等嚴(yán)重的不良反應(yīng)。目前關(guān)于對乙酰氨基酚毒性作用的研究大多集中在動物實(shí)驗(yàn)，代謝過程和統(tǒng)計(jì)分析上，尚未從分子水平上闡明對乙酰氨基酚進(jìn)入體內(nèi)后對生物大分子結(jié)構(gòu)和功能造成的危害，其毒性作用機(jī)理不清楚。
　　 蛋白質(zhì)是地球上生物體的必要組成部分，參與了細(xì)胞生命活動的每一個過程，是生物功能的執(zhí)行者

2、。各種外源小分子進(jìn)入生命機(jī)體后通常會與蛋白質(zhì)相互作用而從分子水平上產(chǎn)生危害性。因此，從分子水平上探討小分子對生物大分子的毒性作用，研究其毒性作用機(jī)理，有助于闡明小分子化學(xué)物的毒性作用機(jī)理，較為全面的評價(jià)其毒性。
　　 本論文從分子水平上研究了對乙酰氨基酚對功能蛋白質(zhì)的毒性作用機(jī)理。按照對乙酰氨基酚進(jìn)入人體后與生物大分子發(fā)生作用的先后順序分別選擇胰蛋白酶、牛血紅蛋白和過氧化氫酶為靶分子，研究了對乙酰氨基酚對蛋白質(zhì)的毒性作用機(jī)理。論

3、文的研究內(nèi)容主要包括以下三個部分:
　　 第一部分:利用熒光光譜、紫外-可見吸收光譜和圓二色譜等光譜學(xué)手段和分子對接技術(shù)研究了對乙酰氨基酚和胰蛋白酶的結(jié)合模式。通過熒光猝滅現(xiàn)象計(jì)算出的熱力學(xué)參數(shù)判斷對乙酰氨基酚與胰蛋白酶之間的主要作用力為疏水作用力。二者的紫外吸收光譜與圓二色譜發(fā)現(xiàn)對乙酰氨基酚使胰蛋白酶所的處微環(huán)境發(fā)生了變化，α-螺旋含量升高，胰蛋白酶的骨架結(jié)構(gòu)發(fā)生改變;對乙酰氨基酚和胰蛋白酶結(jié)合能使胰蛋白酶活性升高。
　

4、　 第二部分:利用多種光譜學(xué)手段和分子模擬技術(shù)研究對乙酰氨基酚和牛血紅蛋白之間的相互作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，對乙酰氨基酚對牛血紅蛋白的熒光猝滅作用是通過靜態(tài)猝滅所導(dǎo)致;對乙酰氨基酚和牛血紅蛋白之間的主要作用力為疏水作用力;生成的復(fù)合物能改變血紅蛋白的二級結(jié)構(gòu)和酪氨酸、色氨酸殘基的微環(huán)境;AutoDock軟件的模擬結(jié)果表明對乙酰氨基酚與牛血紅蛋白在中央空穴結(jié)合并且與Typ37和Tyr145殘基相隔較近。
　　 第三部分:利用熒光光譜

5、技術(shù)研究了對乙酰氨基酚和過氧化氫酶的結(jié)合模式，結(jié)果表明，對乙酰氨基酚對過氧化氫酶的熒光猝滅是靜態(tài)猝滅，主要作用力是疏水作用力。利用紫外-可見吸收光譜、同步熒光光譜和圓二色譜等手段研究了對乙酰氨基酚和過氧化氫酶結(jié)合后導(dǎo)致的蛋白酶結(jié)構(gòu)變化，結(jié)果顯示復(fù)合物的生成導(dǎo)致過氧化氫酶的微環(huán)境發(fā)生改變，α-螺旋含量降低，骨架結(jié)構(gòu)變松散。
　　 本論文的研究成果表明，對乙酰氨基酚進(jìn)入人體后可以改變胰蛋白酶、血紅蛋白和過氧化氫酶的二級結(jié)構(gòu)，可能對蛋