廢紙脫墨漿中過氧化氫酶的研究.pdf

1、本論文以廢紙脫墨廢水為原料，針對(duì)廢紙脫墨系統(tǒng)中微生物產(chǎn)生的過氧化氫酶進(jìn)行了研究。對(duì)樣品成分進(jìn)行分析，并通過電泳對(duì)廢紙脫墨漿中過氧化氫酶和過氧化物酶進(jìn)行鑒定，研究過氧化氫酶的催化性質(zhì)以及金屬離子、羥胺、疊氮化合物等對(duì)過氧化氫酶活性的影響。 在顯微鏡下，脫墨廢水的主要含有細(xì)小纖維和油墨，未見明顯的微生物，氣泡法判斷碎漿工段含有過氧化氫酶，過氧化物酶活性未檢測(cè)到，可溶性蛋白含量極低。 聚丙烯酰胺電泳鑒定出廢紙脫墨廢水中含有過氧

2、化氫酶，未鑒定出存在過氧化物酶。使用聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定廢紙脫墨漿中漂白廢水中過氧化氫酶的最佳實(shí)驗(yàn)條件是濃縮膠為9％，分離膠濃度為4％，各工段樣品的點(diǎn)樣量分別為3μL、5μL和10μL，在此條件下可以得到清楚的圖譜。電泳結(jié)果顯示碎漿含有的過氧化氫酶同工酶系最多，有四種，浮選工段有三種，二段濃縮檢測(cè)到一種，并且不清楚；根據(jù)酶帶遷移率，分子量大小排序應(yīng)為C1＜C2＜C3＜C4＜C5＜C6＜C7，分子量均小于240KDa。 使用紫外

3、分光光度法測(cè)得碎漿工段的過氧化氫酶活性為425.7μmol/min，由于浮選工段過氧化氫酶活性較弱，需要對(duì)它進(jìn)行10倍濃縮才能夠得到可靠的數(shù)據(jù)，其大小為32.5μmol/min，其活性僅為碎漿工段的7.6％，二段濃縮測(cè)量不到結(jié)果。 碎漿工段和浮選工段酶的活性特點(diǎn)是均在pH=8.5表現(xiàn)出較強(qiáng)的活性，最適反應(yīng)溫度應(yīng)在25℃左右，對(duì)堿的適應(yīng)性和穩(wěn)定性較強(qiáng)，但碎漿工段過氧化氫酶的半衰期比浮選工段的長(zhǎng)。碎漿工段的溫度穩(wěn)定性研究發(fā)現(xiàn)此工段的

4、過氧化氫酶不耐高溫，溫度提升到25℃以后活性下降，但在15℃隨保溫時(shí)間的增加，活性增強(qiáng)，將“儲(chǔ)存”的酶活表現(xiàn)出來(lái)。碎漿工段的過氧化氫酶表現(xiàn)出一定的對(duì)H2O2的耐受力，其米氏常數(shù)(Km值)是19.29mM，酶被底物飽和時(shí)的反應(yīng)速度(Vmax)為71.43μmol/min。 金屬離子對(duì)碎漿和浮選工段過氧化氫酶活性的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Mn2+對(duì)酶的活性有促進(jìn)作用，F(xiàn)e2+、Co2+對(duì)酶的活性有較強(qiáng)的抑制作用，Cu2抑制作用溫和，Ba2+和

5、Al3在低濃情況下有微弱的激活作用，高濃時(shí)對(duì)活性抑制作用較明顯，K+、Na+、Ca2+對(duì)酶的活性沒有作用，F(xiàn)e3+對(duì)酶活性影響具有典型性過氧化氫酶的特點(diǎn)。 在有機(jī)溶劑中過氧化氫酶活性有一定的降低，但仍表現(xiàn)出單工能過氧化氫酶的特點(diǎn)。結(jié)合過氧化物酶活性測(cè)量和鑒定，確定了脫墨漿中過氧化氫酶是由單工能過氧化氫酶組成的酶系，不存在過氧化物酶。 在對(duì)過氧化氫酶活性抑制的研究發(fā)現(xiàn)羥胺、疊氮化合物、金屬螯合劑對(duì)過氧化氫酶活性有強(qiáng)烈的抑制