廣東省人群脂肪性肝病臨床和分子流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、本研究擬在廣東地區(qū)開展設(shè)計規(guī)范的大樣本流行病學(xué)調(diào)查，以填補FLD研究資料的空白。 胰島素抵抗(Insulin resistance，IR)是非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié)。IR狀態(tài)下，胰島素對脂肪代謝的調(diào)節(jié)作用減弱，使血中游離脂肪酸(free fatty acid，F(xiàn)FA)增加，肝細胞內(nèi)脂肪儲積沉著使肝細胞變性、腫大，形成脂肪肝；同時FFA可導(dǎo)

2、致脂質(zhì)過氧化，誘導(dǎo)細胞因子并導(dǎo)致線粒體功能障礙。 NAFLD患者體內(nèi)各種細胞因子的失衡導(dǎo)致IR，在NAFLD的發(fā)病過程中起關(guān)鍵作用。IR受免疫細胞和脂肪細胞等分泌的細胞因子如腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、脂聯(lián)素(Adiponectin，ADPN)、瘦素(Leptin，LEP)調(diào)節(jié)。NAFLD發(fā)生過程中，細胞因子的的失衡涉及相關(guān)基因的結(jié)構(gòu)或表達調(diào)控的改變，這些細胞因子的表達受基因多

3、態(tài)性調(diào)節(jié)。NAFLD患者基因組的變異(或多態(tài)性位點)--單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)影響疾病的發(fā)生和發(fā)展。本研究旨在運用分子生物學(xué)技術(shù)，與傳統(tǒng)的流行病學(xué)研究相結(jié)合，以確定廣東漢族人群NAFLD的發(fā)牛、分布、消長和流行規(guī)律。研究目的1、調(diào)查廣東省漢族普通人群FLD的患病率及其主要危險因素。 2、運用分子生物學(xué)技術(shù)，與傳統(tǒng)的流行病學(xué)研究相結(jié)合，研究NAFLD相關(guān)細胞因子TNF

4、-α、ADPN、LEP基因的多態(tài)性與NAFLD的關(guān)系，以了解廣東漢族人群NAFLD的分子流行病學(xué)特點。 研究對象與方法(一)研究實驗方法1、臨床流行病學(xué)調(diào)查方法：廣東省年齡大于7歲的常住居民，采用多階段分層隨機整群抽樣方法，抽取廣東省廣州市人群1436人，同時抽取了廣東省北部的韶關(guān)市南郊金沙小區(qū)719人、東部的惠州市河南岸區(qū)1037人、西部的湛江市調(diào)順村351人，共計3543人。從2005年4月到2005年11月分別對上述地區(qū)進

5、行調(diào)查。調(diào)查內(nèi)容包括一般情況、健康相關(guān)行為特別是飲酒和飲食狀況、疾病史和體檢項目；腹部實時B超檢查；全部脂肪肝患者及配對調(diào)查對象行生化檢查(肝功能、血糖、血脂、血清胰島素水平、肝炎標志物等)。 2、ADPN、TNF-α及LEP基因多態(tài)性檢測：按流行病學(xué)調(diào)查方法在人群中隨機抽取，所選病例按中華醫(yī)學(xué)會肝臟病學(xué)會關(guān)于非酒精性脂肪肝診斷標準(即臨床癥狀、實驗室檢查、和B超為主，必要時活檢)，分為NAFLD組(107例)和對照組(105例

6、)，記錄身體各項測量參數(shù)，進行常規(guī)生化、血脂、病毒性肝炎血清標記物、測空腹血糖、空腹胰島素等檢查，IR采用HOMA穩(wěn)態(tài)模型評估。抽取靜脈血，采用定量酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法定量檢測標本中血漿ADPN、TNF-α和LEP水平，用DNA試劑盒提取基因組DNA，采用PCR-RFLP法檢測ADPN外顯子基因型、TNF-α啟動子區(qū)基因型和LEP肩動子區(qū)基因型。 (二)統(tǒng)計方法采用SPSS13.0進行單因素分析和多因素非條件Logi

7、stic回歸分析。P<0.05認為有統(tǒng)計學(xué)意義。暴露率比較和多元回歸分析判斷危險因素。 研究結(jié)論①廣東省FLD患病率(17.2％)較高，以NAFLD(15.0％)為主，ALD和疑似ALD(0.4％和1.8％)患病率低。FLD患病率隨著年齡的升高有升高的趨勢。50歲以前男性的患病率高于女性，50歲后女性患病率高于男性。 ②廣東省兒童青少年(7-18歲)FLD患者均為NAFLD，其患病率(1.3％)遠低于成人(18歲以上)F

8、LD患病率(19.1％)。鄉(xiāng)村地區(qū)脂肪肝的患病率為12.9％，明顯低于城鎮(zhèn)地區(qū)23％，這種差異豐要是由NAFLD所引起的。 ③IR及其相關(guān)的細胞因子失衡與FLD的關(guān)系密切。體重指數(shù)、腰圍、腰臀比、血清甘油三脂、空腹血糖、高血壓低、ADPN、TNF-α、LEP水平等指標與FLD有關(guān)。ADPN、TNF-α、LEP與IR有密切關(guān)系，其中ADPN與TNF-α相互作用，失衡后導(dǎo)致NAFLD。 ④ADPN基因外顯子2的T45G、TN

9、F-α基因啟動子區(qū)-308、-238位點G→A多態(tài)性、LEP基因啟動子區(qū)-2548位點A→G多態(tài)性在我國廣東地區(qū)漢族人群中存在。 ⑤中國廣東漢族人TNF-α基因啟動子區(qū)．238位點G→A變異NAFLD的發(fā)生有關(guān)，A等位基因可能通過增加TNF-α表達參與IR。TNF-α基因啟動子區(qū)-308位點G→A變異與NAFLD的發(fā)生無關(guān)。 ⑥中國廣東漢族人群ADPN基因外顯子2的T45G多態(tài)性與NAFLD相關(guān)，G等位基因可能通過增加T