過氧化物酶增殖體激活受體-β在急性肺損傷大鼠的作用機(jī)理初探.pdf

1、目的：急性肺損傷(ALI)是一種炎癥和肺毛細(xì)血管通透性增加為主要病理特征的綜合征，急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是ALI的嚴(yán)重階段，目前對(duì)ALI/ARDS的發(fā)病機(jī)理尚未完全闡明。雖然人們已經(jīng)采取多種抗炎治療措施，但迄今仍未取得滿意的結(jié)果，死亡率居高不下。過氧化物酶增殖體激活受體(PPARs)是核受體超家族成員之一，分為PPARα、PPARβ(亦稱PPARδ或NUC-1)和PPARγ三種亞型。研究表明PPARs可能具有重要的抗炎作用。然而

2、在ALI/ARDS發(fā)病中，PPARs在基因、蛋白水平表達(dá)變化及其作用機(jī)理目前尚缺乏研究。為此，本實(shí)驗(yàn)分三部分進(jìn)行： ①觀察PPARβ mRNA和蛋白在正常以及脂多糖(LPS)復(fù)制的大鼠ALI模型肺組織的表達(dá)情況； ②觀察腫瘤壞死因子-α(TNFα)mRNA、蛋白在正常以及ALI大鼠肺組織的表達(dá)情況； ③觀察動(dòng)脈血?dú)夂头谓M織髓過氧化物酶(MPO)活性變化。初探PPARβ與炎性介質(zhì)的關(guān)系。從而說明PPARβ在ALI發(fā)

3、生發(fā)展中可能的作用，以期從新的視角揭示ALI/ARDS的發(fā)病機(jī)理，并為ALI/ARDS的防治提供理論基礎(chǔ)。 方法：采用頸靜脈注射LPS的方法復(fù)制大鼠ALI模型，按完全隨機(jī)化原則將72只實(shí)驗(yàn)大鼠分為生理鹽水對(duì)照組(0h組、1h組、2h組、4h組、8h組)和LPS組(1h組、2h組、4h組和8h組)，每組8只大鼠。半定量RT-PCR方法測(cè)定肺組織中PPARβ mRNA和TNFα mRNA的表達(dá)水平；免疫組織化學(xué)染色法測(cè)定肺組織PPA

4、Rβ蛋白表達(dá)水平；ELISA方法測(cè)定肺組織勻漿上清和血漿中TNFα表達(dá)水平；同時(shí)測(cè)定動(dòng)脈血?dú)夥治?、肺組織W/D比值、肺組織MPO活性、光鏡觀察肺臟病理變化。 結(jié)果： 1.免疫組化顯示對(duì)照組大鼠肺組織可表達(dá)PPARβ蛋白，主要位于肺泡上皮細(xì)胞及肺間質(zhì)細(xì)胞；與對(duì)照組相比，LPS組大鼠肺組織PPARβ蛋白的表達(dá)均顯著升高，分布在肺泡上皮細(xì)胞及炎性細(xì)胞。 2.RT-PCR結(jié)果顯示對(duì)照組肺組織表達(dá)一定量的PPARβ mRN

5、A，與對(duì)照組比較，LPS組大鼠肺組織PPARβ mRNA的表達(dá)量顯著升高。 3.與對(duì)照組比較，TNFα在mRNA以及肺組織勻漿上清和血漿中蛋白水平均顯著升高。 4.LPS組大鼠PaO2顯著降低，肺組織W/D比值、肺組織MPO活性以及肺組織的病理積分均顯著升高。 結(jié)論：正常大鼠肺泡上皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞存在PPARβ，在LPS復(fù)制的ALI大鼠肺組織炎性因子TNFα與PPARβ表達(dá)均顯著增加，提示PPARβ可能與ALI的