過氧化物酶體增殖物激活受體β-δ在小鼠肝癌生成中的作用.pdf

1、研究背景和目的：過氧化物酶體增殖劑激活受體β/δ（PPARβ/δ）屬于配體調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子,在受到配體激動劑激活后,與目標基因啟動子內(nèi)的反應元件結(jié)合,從而調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄過程。PARβ/δ配體分為天然配體和合成配體。前者多為不飽和脂肪酸，包括亞油酸、花生四烯酸、棕櫚酸和PGI2等。而后者，目前已知主要有GW0742、L165041、GW501516等。PPARβ/δ具有提高脂肪酸代謝，增加胰島素敏感性，抑制炎癥反應，增加肌纖維的氧化以提高運

2、動表現(xiàn)等作用。然而，在細胞增殖和癌癥方面，PPARβ/δ作用是促進還是抑制作用，目前還存在爭議。本研究意在觀察過氧化物酶體增殖物激活受體β/δ及其配體L165041在小鼠肝癌發(fā)生中的具體作用，并檢測PPARβ/δ在小鼠肝臟中的表達。
　　方法：設(shè)置包括對照組和實驗組的4個小組。雄性野生型（PPARβ/δ+/+）小鼠和PPARβ/δ基因敲除（PPARβ/δ-/-）小鼠均于15日齡時腹腔注射5mg/kg DEN（二乙基亞硝胺），并給予

3、正常飼料或含有L165041(20ppm)藥物的飼料，觀察小鼠活動情況、毛發(fā)、體重等，約到8個月，處死小鼠并提取肝臟、血液，肉眼觀察小鼠肝臟腫瘤生長情況，HE染色用于光鏡下觀察肝臟病理學改變；用石蠟切片免疫組化技術(shù)（IHC-P）檢測腫瘤組織及癌旁組織中PPAR-β/δ的表達。
　　結(jié)果：服用L165041藥物的PPARβ/δ-/-小鼠患肝癌的比率為76.9％（實驗組3，10/13）；服用正常飼料的PPARβ/δ-/-小鼠患肝癌率為

4、87.5%（實驗組2，7/8）；而服用L165041藥物的野生型小鼠的患肝癌率為11.1%（實驗組1，1/9），及對照組的患肝癌率為25%（2/8），對四組患癌率分別進行卡方檢驗，野生型小鼠患肝癌率顯著小于 PPARβ/δ基因敲除小組(P＜0.05)。而濃度20ppm藥物L165041并不能顯著抑制或促進肝癌的生長。本實驗運用免疫組織化學技術(shù)檢測PPARβ/δ在野生型小鼠的肝癌和癌旁組織中的表達，結(jié)果顯示，PPARβ/δ的表達部位主要位

5、于胞漿，少部分胞核中也有表達。PPARβ/δ在肝癌組織中表達多于癌旁組織，癌旁組織表達較少。同時檢測PPARβ/δ-/-小鼠肝組織中PPARβ/δ的表達，結(jié)果顯示 PPARβ/δ-/-小鼠肝臟中缺乏 PPARβ/δ的表達，這進一步鑒定了野生型小鼠與基因敲除小鼠的基因型。
　　結(jié)論：
　　1.PPARβ/δ具有預防小鼠肝臟成瘤的作用。
　　2.PPARβ/δ在野生型小鼠的肝臟中的表達部位主要位于胞漿，少部分胞核中也有表達