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文檔簡介
1、目的:研究早期母愛剝奪應激和成年慢性不可預知性應激對SD大鼠行為、前額葉皮質DRD1-DRD5mRNA,DATmRNA及蛋白質表達的影響及mi-RNA的調控機制。
方法:將新生SD雄性大鼠隨機分為母愛剝奪應激組(MD)、慢性不可預知性應激組(CUS)和正常對照組(C)。MD組大鼠接受母愛剝奪應激,CUS組大鼠在成年后接受慢性不可預知性應激,對照組不接受任何實驗處理。采用強迫游泳實驗、糖水偏愛實驗和曠場試驗評估大鼠焦慮、抑郁樣行
2、為。采用實時定量熒光PCR檢測前額葉皮質內DRD1-DRD5, DATmRNA和miR-16、miR-200a、miR-207、miR-22、miR-122、miR-96的表達水平;采用免疫印跡法檢測前額葉皮質DRD1-DRD5,DAT蛋白質表達水平。
結果:1.行為學結果:與對照組比較,MD及CUS組大鼠靜止漂浮時間增加,糖水偏愛率降低,直立次數(shù)減少、大便顆粒數(shù)增加;與CUS組比,MD組大鼠靜止漂浮時間長,糖水偏愛率降低。2
3、.蛋白表達檢測結果:與C組比較,MD組的DRD1、DRD5、DRD3、DRD4、DAT及CUS組的DRD1、DRD5、DAT、DRD2蛋白質表達上調。與CUS組比較,DRD5蛋白質表達下調,D2樣受體及DAT蛋白質表達下調。3.基因表達檢測結果:與C組比較,MD組DRD1、DRD5mRNA、DRD3、DRD4、DATmRNA及CUS組的DRD1、DRD5、DRD2、DATmRNA表達上調,與CUS比較,D1樣受體、D2樣受體及DAT蛋白
4、質表達上調。4.mi-RNA表達檢測結果:與C組比較,MD組的miR-207,miR-96的表達降低,CUS組的miR-122、miR-22,miR-207表達增加。miR-22、miR-122、miR-96表達水平分別與DRD4、DRD5、DAT蛋白表達水平明顯相關。5.生物學指標與行為學指標相關結果:DRD1蛋白表達水平與糖水偏愛率相關顯著;DRD1、DRD5,DAT蛋白表達水平與靜止漂浮時間明顯相關;DRD5、DAT與直立次數(shù)相關
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