miR-491-5p調(diào)控DAT基因表達(dá)干預(yù)藥物成癮機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　通過研究miR-491-5p與DAT基因mRNA3’UTR VNTR相互作用，探討其調(diào)控DAT表達(dá)對藥物成癮性的影響。
　　方法：
　　用生物信息學(xué)方法預(yù)測可能與DAT基因mRNA3’UTR VNTR序列有相互作用的miRNA；采用雙熒光素酶報告基因技術(shù)驗(yàn)證miR-491-5p與DAT基因mRNA3’UTR VNTR序列的相互作用；采用逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時熒光定量PCR和蛋白免疫印跡技術(shù)觀察miR-491-5p對DA

2、T基因mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響；并用ELISA技術(shù)檢測miR-491-5p對DAT介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響。
　　結(jié)果：
　　生物信息學(xué)方法預(yù)測到miR-491-5p與DAT VNTR有相互作用；雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測證實(shí)了miR-491-5p與DAT VNTR有相互作用；逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時熒光定量PCR和蛋白免疫印跡技術(shù)顯示，miR-491-5p能夠顯著抑制SK-N-SH細(xì)胞DAT基因mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平