紅藻氨酸致癲癇大鼠腦內NOS動態(tài)表達及托吡酯干預的實驗研究.pdf

1、【目的】研究紅藻氨酸(Kainic acid，KA)致SD大鼠顳葉癲癇發(fā)作及托吡酯(Topiramate，TPM)干預后大鼠行為、腦電圖及一氧化氮合酶的三種不同亞型nNOS、iNOS、eNOS在大鼠腦內不同部位和不同時間的表達，探討nNOS、iNOS、eNOS誘導產生的一氧化氮在大鼠顳葉癲癇中的作用及TPM對三種不同亞型nNOS、iNOS、eNOS的影響，探討TPM的其他可能的抗癲癇機制。 【方法】右側側腦室內緩慢微量注射KA

2、0.2 μ1，濃度為2 μ g/μ 1，誘導成年SD大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作，建立SD大鼠顳葉癲癇模型。分為(1)正常對照組；(2)KA組：癲癇大鼠，未用TPM治療；(3)KA+TPM組：癲癇大鼠，TPM治療組。觀察大鼠行為學變化；描記SD大鼠腦電圖；在1d、1w、2w、3w、4w用免疫組織化學方法觀察nNOS、iNOS和eNOS在SD大鼠腦內不同部位的表達。 【結果】(1)行為學觀察：正常對照組大鼠未觀察到癲癇發(fā)作；KA組在KA右

3、側側腦室內注射后大鼠癲癇的發(fā)生率為83.2％，KA+TPM組為82.6％；KA組76.6％大鼠出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)，在1w，2w，3w，4w分別觀察到有61.0％，26.3％，78.3％，100％的大鼠出現(xiàn)自發(fā)性發(fā)作，死亡率為58.5％；KA+TPM組21.7％大鼠出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)，1w觀察到有24.1％的大鼠出現(xiàn)自發(fā)性發(fā)作，2w以后未觀察到癲癇發(fā)作，死亡率為21.1％。(2)腦電圖表現(xiàn)：癲癇大鼠表現(xiàn)為棘波節(jié)律，單個棘波，尖波，棘慢波，尖慢

4、波等，有時可見陣發(fā)的棘波節(jié)律。(3)NOS的表達：正常對照組nNOS、iNOS、eNOS在大鼠海馬的CA1、CA2、CA3區(qū)、齒狀回，顳葉及丘腦均有少量的表達。KA組：KA致癲癇后，nNOS主要表達在CA1、CA2、CA3區(qū)及顳葉，以急性期增高明顯，在慢性期，在CA2、CA3區(qū)及顳葉的表達也增高。急性期iNOS在各區(qū)表達均增高，慢性期在齒狀回和丘腦的的表達增高。急性期eNOS在CA1、CA2區(qū)及齒狀回表達增高，而在CA3區(qū)表達卻減少，慢

5、性期在各區(qū)表達都增高。KA+TPM組：TPM干預后，明顯降低KA致癲癇后nNOS在CA1、CA2、CA3區(qū)及顳葉的表達，以1d時降低明顯；在CA2、CA3區(qū)及顳葉，減少KA所致的慢性期nNOS表達上調。TPM還降低KA致癲癇后1d時iNOS在CA1、CA3區(qū)、齒狀回及丘腦的表達；在齒狀回，減少KA所致的慢性期iNOS表達上調。TPM干預后明顯降低KA致癲癇后不同時間eNOS在各區(qū)的表達，在急性期，以CA1、CA2區(qū)及齒狀回降低明顯，而在

6、CA3區(qū)，eNOS表達亦較對照組降低，在慢性期，抑制KA所致的eNOS在各區(qū)表達的上調。 【結論】側腦室內微量注射KA可誘導SD大鼠出現(xiàn)類似人類顳葉癲癇的表現(xiàn)和相似的腦電圖改變，是一成功的研究癲癇發(fā)病機制的動物模型。TPM治療能明顯減輕KA誘導的癲癇發(fā)作，降低SD大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)的發(fā)生率，自發(fā)性發(fā)作的發(fā)生率和死亡率。KA致癲癇發(fā)作后，大鼠腦內不同亞型NOS在不同的時間和部位表達不同。TPM治療能不同程度地降低nNOS、iNOS、