負(fù)性共刺激分子PD-1-PD-L1在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、一、PD-1/PD-L1分子在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血單個(gè)核細(xì)胞上的表達(dá)特性及其臨床意義。
　　 [目的]通過檢測系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者不同活動(dòng)期外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化，同時(shí)檢測淋巴細(xì)胞表面PD-1和單核細(xì)胞、B細(xì)胞表面的PD-L1的表達(dá)水平，分析SLE病患者外周血T細(xì)胞、單核細(xì)胞、B細(xì)胞表面PD-1和PD-L1表達(dá)特性，探討機(jī)體中PD-1/PD-L1抑制途徑介導(dǎo)的免疫功能異常在SLE發(fā)生發(fā)展中的生物學(xué)作用。
　　

2、 [方法]收集確診的50例活動(dòng)期SLE患者、69例非活動(dòng)期患者及40例健康志愿者的外周血，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血樣本的CD4+、CD8+T細(xì)胞和CD19+B細(xì)胞百分率，T細(xì)胞、B細(xì)胞表面PD-1的表達(dá)，單核細(xì)胞、B細(xì)胞表面PD-L1的表達(dá)。應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（-x±s）表示，組間比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，圖表制作使用GraphPad Prism5.0。
　　

3、[結(jié)果](1)與健康對照相比，SLE患者外周血CD4+T細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值顯著降低，其中活動(dòng)期顯著低于非活動(dòng)期，CD8+T細(xì)胞百分率顯著升高，其中活動(dòng)期顯著高于非活動(dòng)期，活動(dòng)期患者外周血中B細(xì)胞百分率高于非活動(dòng)期和健康對照。(2)與健康對照組相比，SLE患者外周血T、B淋巴細(xì)胞表面PD-1分子表達(dá)顯著上調(diào)，其中活動(dòng)期也顯著高于非活動(dòng)期。(3) SLE患者外周血B淋巴細(xì)胞表面PD-L1表達(dá)亦顯著增加;活動(dòng)期也顯著高于非活動(dòng)

4、期。(4) SLE患者外周血單核細(xì)胞表面PD-L1表達(dá)顯著增加，然而活動(dòng)期卻顯著低于非活動(dòng)期。
　　 [結(jié)論] T細(xì)胞亞群在活動(dòng)期與非活動(dòng)期SLE患者外周血中均存在異常，B細(xì)胞在活動(dòng)期存在異常，在SLE的免疫病理機(jī)制中具有一定意義。PD-1/PD-L1異常表達(dá)于SLE外周血PBMC的不同亞群表面，并與疾病活動(dòng)度相關(guān)，提示PD-1/PD-L1通路參與了SLE的免疫病理進(jìn)展。
　　 二、可溶性PD-L1分子在SLE患者外周血

5、清中的表達(dá)特性。
　　 [目的]通過檢測SLE患者不同活動(dòng)期外周血清可溶性PD-L1(sPD-L1)的表達(dá)水平，同時(shí)分析活動(dòng)期患者治療前后sPD-L1表達(dá)的變化，探討sPD-L1在機(jī)SLE免疫病理發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。
　　 [方法]收集88例活動(dòng)期SLE患者、73例非活動(dòng)期患者及75例健康志愿者的外周血清，采用ELISA法檢測sPD-L1分子的表達(dá)水平。分析比較其中41例活動(dòng)期患者經(jīng)治療前后sPD-L1分子的表達(dá)變化。

6、應(yīng)用GraphPad Prism5.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 [結(jié)果](1)與健康對照相比，血清sPD-L1分子的表達(dá)上調(diào)，其中活動(dòng)期顯著高于非活動(dòng)期。(2)血清sPD-L1蛋白在治療后病情好轉(zhuǎn)的患者中顯著降低，而在病情惡化的患者中顯著升高。
　　 [結(jié)論]血清sPD-L1分子的表達(dá)在SLE患者中異常高表達(dá)，并與疾病的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，提示sPD-L1分子可能參與機(jī)體長期的自身免疫反應(yīng)，在SLE的免疫病理機(jī)制中具有一

7、定意義。治療后病情出現(xiàn)好轉(zhuǎn)或惡化，sPD-L1的變化也隨之不同，sPD-L1可能會成為評估病情嚴(yán)重程度和判斷治療效果新的輔助參考指標(biāo)。
　　 綜上所述，本課題研究獲得了以下研究結(jié)果:(1) SLE患者外周血淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生不同程度改變，CD4+T細(xì)胞百分率降低，CD8+T細(xì)胞百分率升高，CD4+/CD8+比值降低，B細(xì)胞百分率升高;SLE患者外周血T、B淋巴細(xì)胞表面PD-1分子表達(dá)上調(diào)，B細(xì)胞和單核細(xì)胞表面PD-L1分子表達(dá)上調(diào)

8、，并且不同病情程度的PD-1/PD-L1表達(dá)隨之不同。提示SLE患者存在明顯的細(xì)胞免疫功能異常。(2)sPD-L1分子高表達(dá)于SLE患者外周血清，并且與SLEDAI呈正相關(guān)。隨治療效果的不同sPD-L1表達(dá)變化也有不同趨勢?？扇苄苑肿颖饶ば头肿討?yīng)用范圍更廣，可能通過與APC膜上的PD-L1競爭結(jié)合淋巴細(xì)胞膜上的PD-1，使PD-1/PD-L1之間的相互作用被封閉，降低PD-1受體獲得抑制信號的強(qiáng)度，導(dǎo)致T、B細(xì)胞因缺乏負(fù)性調(diào)控信號而過度