雷公藤內(nèi)酯醇與透明質(zhì)酸復(fù)合制劑對(duì)實(shí)驗(yàn)性兔膝骨關(guān)節(jié)炎治療作用的研究.pdf

1、背景： 在超過50歲以上人群中，骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis，OA)在導(dǎo)致其長期殘疾的疾病中僅次于心血管疾病排名第二。骨關(guān)節(jié)炎的治療的研究很多，新的治療手段不斷出現(xiàn)，但尚不能阻斷病理性破壞過程的進(jìn)展，更不能做到在組織學(xué)意義上的修復(fù)。目前臨床上的治療仍只能是以控制疼痛、減少殘疾、改善關(guān)節(jié)功能和提高生活質(zhì)量為目的。 目的： 由于透明質(zhì)酸(hyaluronicacid，HA)與雷公藤內(nèi)酯醇(triptolid

2、e，TP)都對(duì)早期OA有治療作用，并且HA能夠與藥物相結(jié)合，具有緩釋、控釋作用，兩者聯(lián)用有望從多環(huán)節(jié)上阻斷OA的發(fā)展，達(dá)到免疫抑制、抗炎、軟骨保護(hù)，促進(jìn)軟骨修復(fù)等多重作用，達(dá)到更有效治療OA的目的。所以該實(shí)驗(yàn)采用TP/HA，觀察其療效，初步探討其可能的作用機(jī)理。 方法： 1、Ⅱ型膠原酶關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射法制作兔膝關(guān)節(jié)OA模型 每只兔第1、4d分別雙側(cè)膝關(guān)節(jié)注入Ⅱ型膠原酶溶液0.5ml(含Ⅱ型膠原酶2.0mg)第二次注射

3、后4w，取3只拍X片、MRI后處死，用1ml生理鹽水做關(guān)節(jié)腔沖洗，留取關(guān)節(jié)沖洗液及軟骨、滑膜組織，檢測(cè)并評(píng)價(jià)模型效果。 2、用不同濃度TP/HA治療實(shí)驗(yàn)性兔膝OA(實(shí)驗(yàn)分組方法見表1)。 結(jié)果: 1、Ⅱ型膠原酶關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射法制作兔膝關(guān)節(jié)OA模型的效果 1)注射Ⅱ型膠原酶后2w動(dòng)物開始出現(xiàn)活動(dòng)量下降，休息時(shí)體位改變。 2)注射Ⅱ型膠原酶后4w時(shí)X線片示關(guān)節(jié)間隙變窄，MRI示關(guān)節(jié)軟骨變薄，表面不光滑，

4、軟骨下骨硬化。 表1TP/HA治療兔膝OA實(shí)驗(yàn)分組┏━━━━━━━━┳━━━━━━━━━━━━━━┳━━━━━━━━━━━━━━┓┃┃┃觀察時(shí)間┃┃分組┃治療藥物┃┃┃┃┣━━━━━━━━━━━━━━┫┃┃┃治療4w治療后4w┃┣━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━━━━┫┃陰性對(duì)照組(A組)┃生理鹽水0.4ml┃A1組(2只)A2組(2只)┃┃陽性對(duì)照組(B組)┃生理鹽水0.2ml+HA0.2

5、ml┃B1組(3只)B2組(3只)┃┃┃0.5×10-3mg/mlHA0.2ml+┃┃┃治療組1(C組)┃┃C1組(3只)C2組(3只)┃┃┃HA0.2ml┃┃┃┃1×10-3mg/mlTP0.2ml+HA┃┃┃治療組2(D組)┃┃D1組(3只)D2組(3只)┃┃┃0.2ml┃┃┃┃2×10-3mg/mlTP0.2ml+HA┃┃┃治療組3(E組)┃┃E1組(3只)E2組(3只)┃┃┃0.2ml┃┃┗━━━━━━━━┻━━━━━━━━━━

6、━━━━┻━━━━━━━━━━━━━━┛注：注射Ⅱ型膠原酶后4w，用相應(yīng)的藥物進(jìn)行雙膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射，1次/w，共4次。 3)組織形態(tài)學(xué)上軟骨及滑膜都有退變，關(guān)節(jié)軟骨退變的Mankin評(píng)分明顯高于正常對(duì)照組(P＜001)； 4)軟骨中膠原總量、Ⅱ型膠原及粘多糖含量明顯低于正常(P＜001)，Ⅱ型膠原較膠原總量的減少更為明顯。 5)關(guān)節(jié)液及軟骨中IL-1β、TNF-α、MMP-3含量明顯較正常增多(P＜001)。

7、 2、TP/HA治療實(shí)驗(yàn)性兔膝OA的效果 1)治療組治療4w后動(dòng)物休息時(shí)體位基本恢復(fù)正常，體重增長趨勢(shì)大于陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組。 2)大體觀察和組織形態(tài)學(xué)上軟骨的退變程度均較陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組輕。 3)陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組關(guān)節(jié)液中IL-1β、MMP-3、TNF-α隨著時(shí)間的延長逐漸增高，且陽性對(duì)照組明顯低于同期陰性對(duì)照組。治療組從均值上也有此趨勢(shì)，但在統(tǒng)計(jì)學(xué)上與正常對(duì)照組無顯著差異(P＞0.05)。

8、 4)治療組軟骨中粘多糖含量均不同程度的高于同期陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組；E2組軟骨中粘多糖含量(OD值)明顯高于E1組(P＜0.01)，與正常對(duì)照組接近(P＞0.05)；其余各組治療4w和治療后4w軟骨中粘多糖含量無顯著差異(P＞0.05)。 5)各組股骨髁軟骨中膠原總量及Ⅱ型膠原含量均正常為低，但Ⅱ型膠原含量下降更加明顯；治療組Ⅱ型膠原含量高于同期陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組。 6)治療組關(guān)節(jié)軟骨退變的mankin評(píng)分

9、均低于同期陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組(P＜0.05)，治療后4wmankin評(píng)分接近正常(P＞0.05)，低于治療4w時(shí)(P＜0.05)。 結(jié)論: 1.Ⅱ型膠原酶關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射法制作的兔膝關(guān)節(jié)OA模型，在病理學(xué)改變上與早期OA基本一致，且方法簡(jiǎn)單，周期較短，為一種較為理想的早期OA動(dòng)物模型。 2.關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射TP/HA，在一定的時(shí)限內(nèi)能有效地減緩Ⅱ型膠原酶誘導(dǎo)的兔膝關(guān)節(jié)早期OA的進(jìn)展，并促進(jìn)其軟骨修復(fù)，且療效優(yōu)于單用H