透明質(zhì)酸鈉注射液對(duì)兔膝創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎軟骨修復(fù)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎在骨科臨床診療中已很常見,它嚴(yán)重地困擾著患者日常生活和工作,給身心帶來了極大的痛苦,給家庭及社會(huì)造成了極大的負(fù)擔(dān)。但由于關(guān)節(jié)軟骨內(nèi)沒有神經(jīng)、血管及淋巴管,故缺乏營養(yǎng)供應(yīng),其損傷后自身難以修復(fù)。目前對(duì)其治療的方法有很多,如軟骨下骨鉆孔術(shù)、骨膜及軟骨膜移植術(shù)、自體軟骨細(xì)胞移植術(shù)、基因和組織工程治療等等,但這些大多處于實(shí)驗(yàn)階段,臨床療效不肯定。有不少報(bào)道應(yīng)用透明質(zhì)酸鈉關(guān)節(jié)內(nèi)注射治療退行性骨關(guān)節(jié)炎取得了良好的療效,但關(guān)于透明質(zhì)

2、酸鈉注射液對(duì)關(guān)節(jié)軟骨直接損傷后是否能改善其修復(fù),目前此方面的報(bào)道很少。本實(shí)驗(yàn)通過切斷兔膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶,軟骨下骨鉆孔方法建立兔膝關(guān)節(jié)軟骨全層缺損模型,初步探討膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)應(yīng)用透明質(zhì)酸鈉注射液對(duì)關(guān)節(jié)軟骨損傷繼發(fā)的創(chuàng)傷性骨關(guān)節(jié)炎的防治作用,為臨床治療創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 用來實(shí)驗(yàn)的10只新西蘭大白兔提前十天飼養(yǎng),觀察沒有疾病并且能夠正常進(jìn)食及飲水后,再用于實(shí)驗(yàn)。術(shù)前十二小時(shí)禁食水,雙側(cè)后肢膝關(guān)節(jié)去毛備

3、皮。將10只新西蘭大白兔雌雄各半,共20個(gè)膝關(guān)節(jié),先切斷兔的膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶,再用直徑為3.2毫米的骨科手術(shù)電鉆,于股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)軟骨面中央處鉆一直徑為3.2毫米全層軟骨缺損,深度要以缺損區(qū)域滲血為標(biāo)準(zhǔn),然后用生理鹽水沖洗干凈。嚴(yán)格按照上述標(biāo)準(zhǔn)將20只膝關(guān)節(jié)制成直徑為3.2毫米大小的關(guān)節(jié)軟骨全層缺損模型,并將其配對(duì)分為兩組:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組(注:同一只兔子的兩膝關(guān)節(jié)不編入同一組),每組各10個(gè)兔膝關(guān)節(jié)。在手術(shù)后的前8天,膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)不做任何藥

4、物注射,以便讓手術(shù)創(chuàng)傷所引起的炎癥反應(yīng)逐漸消退。于術(shù)后第9天開始,右膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射1％透明質(zhì)酸鈉注射液0.2毫升,左膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射0.9％生理鹽水0.2毫升,每5天膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射1次,共注射7次。于術(shù)后第8周將實(shí)驗(yàn)兔殺死,取各組膝關(guān)節(jié)軟骨缺損修復(fù)組織,并進(jìn)行大體形態(tài)觀察評(píng)分;蘇木素一伊紅染色(即HE染色)的組織學(xué)形態(tài)觀察;免疫組織化學(xué)研究Ⅱ型膠原的表達(dá),并進(jìn)行評(píng)分。
　　 結(jié)果:
　　 1：用藥5周后各組大體形態(tài)學(xué)表現(xiàn):

5、實(shí)驗(yàn)組:關(guān)節(jié)軟骨表面的缺損區(qū)外形修復(fù)基本完全,缺損區(qū)主要由類軟骨組織修復(fù),關(guān)節(jié)內(nèi)未見明顯粘連;對(duì)照組:關(guān)節(jié)軟骨表面的缺損區(qū)外形修復(fù)不完全,缺損區(qū)主要由紅色肉芽組織覆蓋,被修復(fù)的組織區(qū)域明顯低于正常關(guān)節(jié)軟骨表面,并見缺損區(qū)域周圍組織退變較明顯。用藥5周后,實(shí)驗(yàn)組大體形態(tài)學(xué)評(píng)分高于對(duì)照組,有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2：用藥5周后各組HE染色組織學(xué)觀察:實(shí)驗(yàn)組由類軟骨組織修復(fù),被修復(fù)的組織表面比較平整,被修復(fù)的組織內(nèi)細(xì)胞形

6、態(tài)與正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞非常相似,細(xì)胞層次比較明顯,排列比較規(guī)律,下潮線大致恢復(fù)。對(duì)照組修復(fù)的缺損區(qū)可見大量纖維組織,被修復(fù)的組織表面不平整,缺損周圍與正常關(guān)節(jié)軟骨部分融合,其細(xì)胞形態(tài)與正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞差別比較大,排列很不規(guī)律,細(xì)胞分層不明顯,下潮線消失。用藥5周后,實(shí)驗(yàn)組組織學(xué)評(píng)分高于對(duì)照組,有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 3：用藥5周后,實(shí)驗(yàn)組:缺損區(qū)域主要由類軟骨組織修復(fù),與周圍的正常關(guān)節(jié)軟骨結(jié)合緊密,被修復(fù)的組織淺層細(xì)

7、胞內(nèi)可見Ⅱ型膠原陽性表達(dá),被修復(fù)的組織中間層及其底層細(xì)胞內(nèi)未見Ⅱ型膠原陽性表達(dá),細(xì)胞無成簇,排列比較規(guī)律;對(duì)照組:缺損區(qū)域主要由纖維組織修復(fù),與周圍的正常關(guān)節(jié)軟骨僅部分連接,結(jié)合不緊密,只有少量細(xì)胞生成,組織淺層細(xì)胞內(nèi)Ⅱ型膠原陽性表達(dá)較微弱,細(xì)胞排列欠規(guī)律。用藥5周后,實(shí)驗(yàn)組Ⅱ型膠原軟骨缺損區(qū)陽性表達(dá)高于對(duì)照組,有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 兔膝關(guān)節(jié)軟骨全層缺損后給予透明質(zhì)酸鈉治療,實(shí)驗(yàn)組缺損組織修