狼毒大戟三萜的提取純化、鑒定與抑瘤抑菌等作用研究.pdf

1、惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類生命健康的重大疾病，也是目前醫(yī)學(xué)上最難醫(yī)治的頑癥之一。尋求徹底治療癌癥的手段與藥物已成為人們的迫切需要，科學(xué)界也將尋找具有新靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物作為研究的熱點(diǎn)之一。天然資源的生物多樣性和天然化合物的結(jié)構(gòu)多樣性為發(fā)掘抑癌新藥提供了廣泛的機(jī)遇。中藥是祖國(guó)醫(yī)學(xué)的重要組成部分，研究發(fā)現(xiàn)中草藥在抑制或殺傷腫瘤細(xì)胞方面，還是患者改善癥狀和減輕放化療的不良反應(yīng)等方面均發(fā)揮了不可低估的作用。然而，傳統(tǒng)中藥大都采用含數(shù)十種化合物的多味藥

2、材組成的復(fù)方進(jìn)行治療，這樣復(fù)雜的藥物體系給現(xiàn)代藥理評(píng)價(jià)帶來(lái)極大的挑戰(zhàn)，也是中醫(yī)藥被認(rèn)為“說(shuō)不清、道不明”的一個(gè)主要原因;若能對(duì)單味中藥，特別是起特異治療效果的某單一組分進(jìn)行研究，明確療效與作用機(jī)制，不僅經(jīng)濟(jì)，療效可靠，還可為設(shè)計(jì)更理想的新藥提供新的化學(xué)結(jié)構(gòu)，后者常為創(chuàng)制新藥的先導(dǎo)化合物。本課題基于此思路對(duì)傳統(tǒng)中藥材狼毒大戟進(jìn)行藥用成分提取純化、結(jié)構(gòu)分析與及抑瘤、抑菌和清除自由基等方面的研究。
　　狼毒大戟(Euphorb ia f

3、ischeriana)是我國(guó)傳統(tǒng)中藥材，又名狼毒、貓眼睛，是大戟科大戟屬多年生草本植物，主要生長(zhǎng)于丘陵坡地以及林緣地帶。植物中的三萜類物質(zhì)已被證實(shí)具有抗菌消炎，抗腫瘤，抗病毒的作用。許多學(xué)者研究了狼毒大戟中的多種活性成分，但是對(duì)狼毒大戟三萜類物質(zhì)的提取、分離以及生物活性等研究至今鮮有報(bào)道。本文對(duì)狼毒大戟三萜類物質(zhì)進(jìn)行了提取和初步分離，結(jié)合對(duì)其多方面的生物活性的考察，以期對(duì)其合理利用提供一些理論參考。研究的主要內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　

4、1.利用超聲波輔助法提取狼毒大戟根部總?cè)莆镔|(zhì)，通過(guò)香草醛-硫酸法對(duì)其進(jìn)行定量測(cè)定，同時(shí)進(jìn)行方法學(xué)考察，根據(jù)單因素結(jié)果設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)確定最佳工藝。結(jié)果表明:提取方法簡(jiǎn)單高效，可信度高。狼毒大戟總?cè)频淖罴烟崛」に嚍橐掖俭w積分?jǐn)?shù)為80％，料液比為1∶10，超聲功率為70W，超聲處理時(shí)間為60min，最高提取率為5.86％。
　　2.通過(guò)定性測(cè)定的顏色反應(yīng)，結(jié)合紅外、紫外光譜及化學(xué)預(yù)試等方法提取物進(jìn)行成分分析，然后利用有機(jī)溶劑萃取對(duì)其進(jìn)

5、行組分化分離。結(jié)果表明提取物中可能含有鞣質(zhì)、甾體、有機(jī)酸和黃酮類以及三萜類物質(zhì)。石油醚層、乙酸乙酯層、正丁醇、萃余水層中三萜含量比例約為36∶6∶5∶12。
　　3.利用濾紙片法以及試管二倍稀釋法研究不同萃取層對(duì)5種常見(jiàn)菌（金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、綠膿桿菌）的抑菌效果;然后利用三種自由基清除模型（DPPH、羥基以及超氧陰離子自由基）確定各萃取層自由基清除能力。結(jié)果表明，除萃余水層外，其它各層對(duì)5種菌均有一定的