枇杷葉多酚提取、純化及其抗氧化、抑菌活性研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以枇杷葉為材料，采用溶劑提取法提取枇杷葉多酚類物質(zhì)，并對(duì)其提取工藝進(jìn)行優(yōu)化提高枇杷葉多酚的提取率，然后對(duì)提取多酚類物質(zhì)利用大孔樹脂進(jìn)行純化，利用高效液相色譜法初步鑒定枇杷葉多酚類物質(zhì)的組成，最后采用多種方法研究枇杷葉多酚的抗氧化活性和抑菌活性。研究結(jié)論：
　?。?）利用響應(yīng)面分析法，優(yōu)化枇杷葉多酚提取工藝，結(jié)果表明料液比、提取溫度和提取時(shí)間是影響枇杷葉多酚提取率的最主要因素，乙醇濃度影響最小，枇杷葉多酚最優(yōu)提取工藝為料液比1

2、:21，乙醇濃度48.5％，溫度60℃，時(shí)間2.6 h，得到枇杷葉多酚實(shí)際提取率值為3.40%。
　　（2）通過(guò)比較六種大孔樹脂的吸附與解吸能力，選擇D101大孔樹脂來(lái)純化枇杷葉多酚，通過(guò)靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)，得到D101樹脂純化枇杷葉多酚的方案：多酚濃度為2.0 mg/mL的溶液進(jìn)行上樣，流速控制在2.0 mL/min；解吸劑選用60%的乙醇溶液，洗脫流速為1.0 mL/min，洗脫液體積為250 mL；最終收集合并100~200

3、 mL之間的洗脫液，經(jīng)過(guò)濃縮冷凍干燥得到枇杷葉多酚純樣粉末。該工藝經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，枇杷葉多酚的含量從13.23%上升到68.48%。
　?。?）利用高效液相色譜分析法初步研究枇杷葉多酚的組成，研究發(fā)現(xiàn)枇杷葉多酚粗樣和枇杷葉多酚純樣都含有五種相同的成分，分別是沒(méi)食子酸、香草酸、丁香酸、阿魏酸、槲皮素。通過(guò)定量分析結(jié)果為枇杷葉多酚粗樣中沒(méi)食子酸、香草酸、丁香酸、阿魏酸、槲皮素物種單體的含量分別為：1.057 mg/g、1.197 mg/g、

4、1.439 mg/g、2.234 mg/g、1.068 mg/g；枇杷葉多酚純樣中五種單體的含量分別為：12.731 mg/g、8.433 mg/g、8.651 mg/g、9.477 mg/g、18.554 mg/g。
　?。?）采用體外抗氧化實(shí)驗(yàn)，研究枇杷葉多酚粗樣、純樣的抗氧化能力，并且以常用抗氧化劑抗壞血酸和應(yīng)用最廣泛的多酚類物質(zhì)茶多酚作為對(duì)照。本研究的數(shù)據(jù)顯示枇杷葉多酚顯示出較好的清除DPPH、ABTS+、羥自由基、亞硝基

5、的作用，并且還原能力顯著，可以作為潛在的天然抗氧化劑的來(lái)源。
　?。?）濾紙片法測(cè)定抑菌效果表明，純化后枇杷葉多酚對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌兩種細(xì)菌的抗菌效果最顯著，并且隨著多酚濃度的升高，抑制作用增加。枇杷葉多酚對(duì)枯草芽孢桿菌和銅綠假單孢桿菌的抑制效果較差，升高到一定濃度，其對(duì)枯草芽孢桿菌的抑菌效果趨于穩(wěn)定，濃度較小時(shí)，對(duì)銅綠假單孢桿菌沒(méi)有抑菌效果。通過(guò)肉湯微量稀釋法測(cè)定最低抑菌濃度和最低殺菌濃度的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明枇杷葉多酚對(duì)大腸桿