蒲公英抑菌成分的分離與鑒定.pdf

1、蒲公英是一味重要的臨床常用中草藥，集藥用和食用于一身，具有清熱解毒、消腫散結(jié)和利尿通淋的功效。臨床上主要用于治療乳癰、瘰疬、疔瘡腫毒、咽痛、肺癰、腸癰、目赤、濕熱黃疸、熱淋澀痛等癥。藥理試驗表明，蒲公英具有廣譜抗菌、保肝利膽、抗內(nèi)毒素、健胃和免疫促進作用。 目前，蒲公英在人醫(yī)和獸醫(yī)臨床上主要用于各類炎癥，特別是乳房炎。藥理試驗表明蒲公英具有較好的抗菌消炎作用，然而大多研究都是以蒲公英粗提物為研究對象的，其單體對臨床乳房炎主要致病

2、菌活性的研究報道較少。本試驗?zāi)康氖且耘R床乳房炎的5種主要致病菌追蹤分離純化蒲公英中具有抑菌活性的化合物單體成分，為臨床乳房炎的治療和應(yīng)用奠定物質(zhì)基礎(chǔ)，同時也為蒲公英的藥理研究和臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。本試驗采用超聲波新技術(shù)提取藥用蒲公英的干燥全草，利用大孔吸附樹脂柱分離，依次分別用蒸餾水、40％和90％乙醇溶液洗脫，用薄層層析紫外檢測，將成分相同或相近的部分合并減壓濃縮，可得水洗部分(A)、40％乙醇洗脫部分(B)和90％乙醇洗脫部分(C

3、)。定性試驗說明，A不含酚類、有機酸和黃酮類化合物；B可能含有酚類和有機酸類化合物，但不含黃酮類化合物；C可能含有黃酮類化合物。 紙片法以臨床乳房炎主要的5種感染菌株——金黃色葡萄球菌(S.Aureas)、大腸埃希菌(E.coli)、無乳鏈球菌(S.dysagalactiae)、停乳鏈球菌(S.agalactiae)和乳房鏈球菌(S.uberis)檢測A、B、C三部分的抑菌活性，抑菌試驗證明，A無抑菌活性，B和C有抑菌活性。對B

4、和C用硅膠柱等進一步分離純化，同時紙片法追蹤各個分離部分的抑菌活性，直至得到5種化合物單體Ⅰ～Ⅴ。Ⅰ～Ⅴ的質(zhì)量mg分別為12.7、17.0、4.0、20.0、1103.0。 抑菌試驗表明，化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、無乳鏈球菌、停乳鏈球菌和乳房鏈球菌均有抑菌活性，Ⅳ無抑菌活性。其中V對上述5種菌的最低抑菌濃度(MIC)mg/mL分別為0.1953×10-2、3.125×10-2、0.7813×10-2、12

5、.5×10-2、0.3906×10-2，最低殺菌濃度(MBC)mg/mL分別為3.125×10-2、12.5×10-2、6.25×10-2、大于0.25、0.125。 采用紫外可見分光光度計、GC-MS聯(lián)用儀、核磁共振光譜儀、紅外光譜儀和標準對照品等分析和鑒定化合物單體Ⅰ～Ⅴ的結(jié)構(gòu)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ分別為1,2-二羥基-4，11(13)-桉雙烯酮-12,6-交酯、1，3-二羥基-11(13)-桉雙烯酮-12,6-交酯、正二十九烷烴