蟾皮的質(zhì)量標準和指紋圖譜及藥代動力學研究.pdf

1、目的：
　　蟾皮是中醫(yī)臨床常用中藥。本課題就蟾皮的質(zhì)量標準和指紋圖譜及藥代動力學進行了研究，目的在于建立蟾皮的中藥材標準，明確蟾皮中的活性成分，闡明蟾皮的藥代動力學規(guī)律，為蟾皮的開發(fā)和應用以及物效基礎研究提供依據(jù)。
　　方法：
　?。?）蟾皮質(zhì)量標準研究：通過理化性質(zhì)、薄層鑒別等試驗研究方法，檢測水分、灰分含量，高效液相色譜法測定蟾皮中脂蟾毒配基和華蟾酥毒基含量，為制定蟾皮質(zhì)量標準提供方法學支持。（2）蟾皮指紋圖譜的研

2、究：采用高效液相色譜技術（HPLC），對10個不同產(chǎn)地蟾皮藥材進行成分分析，結合9種已知的蟾蜍二烯羥酸內(nèi)酯類對照品進行對照比較，分析各產(chǎn)地藥材的共有峰，計算其相對保留時間（RRT）與相對峰面積（RPA），結果運用相關系數(shù)法進行相似度評價，建立蟾皮藥材的指紋圖譜。（3）蟾皮抗腫瘤成分的藥代動力學研究：分別對蟾皮中具有抗腫瘤活性的單體物質(zhì)和蟾皮提取物進行藥代動力學試驗，灌胃給予大鼠適量脂蟾毒配基、華蟾酥毒基、蟾毒靈和蟾皮提取物，在給藥后不同

3、時間采集血液樣本，利用高效液相色譜法檢測血藥濃度，結果用藥代動力學軟件處理，擬合藥時曲線并得到相應的藥代動力學參數(shù)。
　　結果：
　　（1）參照《中國藥典》標準和要求，蟾皮藥材質(zhì)量標準的主要指標確定為，【水分】不超過12.0％；【總灰分】不超過14.5％；【酸不溶性灰分】不超過5.0％；【含量測定】華蟾酥毒基含量不低于0.02％，脂蟾毒配基含量不低于0.01％。（2）建立了蟾皮藥材指紋圖譜的檢測方法，篩查出29個共有色譜峰，

4、其中包括9種蟾蜍二烯羥酸內(nèi)酯類化合物，分別為日蟾毒它靈（GBT）、沙蟾毒精（ABG）、遠華蟾毒精（TCB）、去乙酰華蟾毒它靈（DCB）、蟾毒它靈（BFT）、華蟾毒它靈（CBG）、蟾毒靈（BFL）、華蟾酥毒基（CBG）、脂蟾毒配基（RBG）；發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地蟾皮藥材的主要成分相似度較高，但其含量卻存在較大的差異，其中陜西西安所產(chǎn)蟾皮藥材中9種成分總含量最高（19.0μg/g），山東濟南所產(chǎn)蟾皮藥材中9種成分總含量最低（5.2μg/g），各地藥

5、材中，華蟾酥毒基的平均含量最高（2.13μg/g），其余依次分別為蟾毒靈（1.45μg/g）、脂蟾毒配基（1.18μg/g）、蟾毒它靈（0.96μg/g）、日蟾毒它靈（0.82μg/g）、華蟾毒它靈（0.82μg/g）、去乙酰華蟾毒它靈（0.62μg/g）、沙蟾毒精（0.43μg/g）、遠華蟾毒精（0.26μg/g）。（3）脂蟾毒配基、華蟾酥毒基灌胃給藥后，大鼠體內(nèi)未檢測到原型，均以代謝產(chǎn)物的形式存在；蟾毒靈單體給藥后藥代動力學參數(shù)分別

6、為AUC(0-t)=975.89mg/L·min，AUC(0-∞)=1067.69mg/L·min，MRT(0-t)=234.21min，MRT(0-∞)=608.08min，t1/2z=375.76min，Tmax=22.50min，CLz/F=0.008L/min/kg，Vz/F=3.51L/kg，Cmax=4.66mg/L；蟾皮提取物給藥后藥代動力學參數(shù)分別為AUC(0-t)=476.87mg/L·min，AUC(0-∞)=518

7、.43mg/L·min，MRT(0-t)=160.69min，MRT(0-∞)=221.46min，t1/2z=146.76min，Tmax=26.25min，CLz/F=0.023L/min/kg，Vz/F=4.56L/kg，Cmax=3.00mg/L；單體組與提取物組比較后得出AUC(0-t)、AUC(0-∞)、MRT(0-t)、MRT(0-∞)、t1/2z、Tmax、CLz/F、Vz/F、Cmax等參數(shù)的P值分別為0.0279、0

8、.0021、0.0045、0.0201、0.0246、0.5536、0.0029、0.3251、0.1894，可見兩組在Tmax、Vz/F和Cmax方面無差異，而在AUC(0-t)、AUC(0-∞)、MRT(0-t)、MRT(0-∞)、t1/2z和CLz/F方面有顯著性差異。
　　結論：
　　蟾皮藥材具有顯著的地域性特點，不同產(chǎn)地藥材中各蟾蜍二烯羥酸內(nèi)酯類成分的含量存在較大差異；蟾皮提取物給藥與蟾毒靈單體給藥相比，能夠有效地