苧麻纖維素合成酶基因cDNA的克隆及功能分析.pdf

1、分類號UDC湖南農(nóng)業(yè)大學≈Y9《蠢舅搴鞋密級——單位代碼!Q5≥Z碩士學位論文苧麻纖維素合成酶基因cDNA的克隆及功能分析CloningandFunctionalAnalysisofCelluloseSynthaseGenecDNAofRamie(Boehmerianivea)研究生姓名指導教師學科專業(yè)研究方向圈直豎韭堂塞熬援紐照生物堂僉王細胞壘物堂提交論文日期2幽壹生旦!旦答辯委員會主席百灘濤學位授予日期論文答辯日期2QQ魚生且生旦論

2、文評閱人群詹雪日睡苧麻纖維素合成酶基因CD雌的克隆及功能分析中文摘要苧麻(Boehmerianivea)是一種我國傳統(tǒng)的重要纖維作物，其麻皮纖維是主要收獲物。當今一些模式植物纖維素合成分子生物學研究取得了良好的進展，為苧麻纖維素合成的分子生物學研究提供了豐富的參考。本研究以苧麻為材料，提取其總RNA并反轉(zhuǎn)錄成eDNA，通過設計一對簡并引物擴增出纖維素合成酶基因中間片段，然后通過RACE技術分別獲得基因3’端包含多聚A尾的序列和5’端大部

3、分序列(尚缺失包括起始密碼子在內(nèi)的約450bp序列)。將三段序列分別測序并拼接成一長3276bp的cDNA序列，其讀碼框可翻譯成一段包含938個氨基酸的蛋白質(zhì)。經(jīng)BLAST及蛋自質(zhì)結(jié)構分析，證實我們得到的eDNA序列即是苧麻纖維素合成酶基因序列，按照纖維素合成酶基因命名規(guī)則將其命名為BnCesAl，并將此序列提交GenBm血，登陸號為：DQ077190。為了進一步了解BnCesAl基因在苧麻組織中的表達情況，揭示苧麻纖維素合成及其基因表

4、達調(diào)控機制，以BnCesAl基因3’端非保守區(qū)域為檢測目的基因，苧麻18SrRNA為內(nèi)參基因，應用RT—PCR技術對苧麻纖維素合成酶基因的表達進行半定量，建立一個針對BnCesAl的特異、穩(wěn)定的RTPCR半定量檢測體系。結(jié)果顯示在苧麻根、莖、葉、芽中都可檢測到BnCesAl基因的表達，其表達模式為：莖葉芽根，相對表達量依次為：O791，O381，O319，O183；推導BnCesAl蛋白與模式植物擬南芥(Arabidopsisthali