人可溶性TRAIL重組腺病毒治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)屬于腫瘤壞死因子超家族成員,它通過(guò)與死亡受體結(jié)合來(lái)引起凋亡.與其他細(xì)胞因子不同,TRAIL特異性的與它的受體結(jié)合來(lái)介導(dǎo)凋亡:與TRAIL-R1/DR4和TRAIL-R2/DR5結(jié)合將引起凋亡,而與另兩個(gè)誘騙受體TRAIL-R3/DcR1和TRAIL-R4/DcR2結(jié)合則不能介導(dǎo)凋亡.TRAIL能夠特異性地誘導(dǎo)轉(zhuǎn)體細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞而對(duì)正常組織細(xì)胞沒(méi)有殺傷作用,正是這一特征,使其具有潛在的靶向抗癌前景

2、.為了觀察TRAIL重組腺病毒對(duì)肝癌的殺傷作用,首先從正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞中RT-PCR克隆人可溶性TRAIL基因,核酸測(cè)序結(jié)果與Genebank上的完全一樣.在此基礎(chǔ)上利用Cre/loxP位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)構(gòu)建腺病毒載體.將pUC19-TRAIL克隆到腺病毒穿梭載體pDC315上,與5型腺病毒右臂質(zhì)粒pBGHloxPΔE1E3通過(guò)Lipofectamine2000共轉(zhuǎn)染至293細(xì)胞而發(fā)生重組.同時(shí)重組腺病毒Ad-TRAIL在其中復(fù)制

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