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文檔簡介
1、阻塞性黃疸是臨床上常見的一種病理過程。無論是良性疾病(如結石、膽管囊腫等)還是惡性疾病(如胰頭癌、膽管癌等)引起的阻塞性黃疸,其術后常伴有感染、胃腸道出血、傷口愈合延遲等并發(fā)癥,甚至出現(xiàn)肝、腎功能衰竭、敗血癥等導致死亡。近年來研究表明阻塞性黃疸時機體免疫功能的改變,特別是內毒素血癥啟動的炎癥反應,炎癥介質(包括細胞因子、粘附分子等)的釋放以及炎癥介質導致的肝臟和遠隔器官產生炎癥損傷與阻塞性黃疸后的各種并發(fā)癥密切相關。核因子кB(Nucl
2、ear Factor kappa B,NF-кB)是一種廣泛存在于真核細胞中的轉錄因子。它通過調控諸多細胞介質基因的表達從而在機體自然及獲得性免疫中發(fā)揮重要的作用。激活后的NF-кB通過胞核核膜上的受體進入胞核,與相關基因的кB位點發(fā)生特異性結合,促進有關基因的轉錄。這些被調節(jié)的靶基因常與炎癥、免疫密切相關,其中主要包括細胞因子(如,TNF-α、IL-1等)、粘附分子、主要組織相容性復合物(major histocompatibilit
3、y complex,MHC)、抗原遞呈相關蛋白等。本研究旨在探索阻塞性黃疸時肝臟NF-кB對炎癥介質的調控及其在肝損傷中的作用,并在此基礎上考察NF-кB特異性抑制劑吡咯烷二硫氨基甲酸脂(Pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)對阻塞性黃疸時肝臟損傷的保護作用。 本實驗采用健康SD大鼠54只,由中國科學院上海實驗動物中心提供,體重250~300克。實驗動物隨機分為三組,每組18只。建立大鼠阻塞性黃疸模型
4、,對照組僅游離膽總管,不結扎或斷離膽總管。實驗組予以結扎并切斷膽總管。PDTC組予以結扎并切斷膽總管,并在術前術后予以腹腔注射PDTC。觀察上述各組在術后4天(d)、7d、14d時的肝組織NF-кB P65蛋白表達,腫瘤壞死因子-α(TNF-α)mRNA、白介素-6(IL-6)mRNA、細胞間粘附分子-1(ICAM-1)mRNA表達以及血清總膽紅素(TB)、谷丙轉氨酶(ALT)水平。用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析,實驗數(shù)據用均
5、數(shù)±標準差(x±s)表示。計量資料用單因素方差分析處理,兩兩間比較用q檢驗,并對NF-кB與TNF-α mRNA、IL-6mRNA、ICAM-1 mRNA的表達分別進行直線相關分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義,P<0.01表示差異有顯著統(tǒng)計學意義。 實驗結果顯示術后4d、7d、14d大鼠出現(xiàn)明顯的肝損傷,表現(xiàn)為TB、ALT的明顯增高,肝組織NF-кB P65蛋白表達明顯增加,TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、ICA
6、M-1 mRNA表達也增強。PDTC組大鼠肝NF-αB P65、ICAM-1 mRNA表達較實驗組各時相點有顯著下降,血清ALT和肝組織TNF-α mRNA較實驗組在4、7d有明顯下降。阻塞性黃疸時肝臟中NF-кB被大量激活,激活的NF-кB上調了炎癥介質(TNF-α、ICAM-1)的表達,從而造成肝損傷。NF-кB特異性抑制劑PDTC可抑制阻塞性黃疸時肝臟NF-кB的激活,并可減輕病程早期的肝臟損傷。 最后,關于進一步工作的方
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