銀杏達(dá)莫注射液對(duì)缺氧-再?gòu)?fù)氧損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、目的：本研究的目的是通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、MTT法、檢測(cè)細(xì)胞上清液中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性來(lái)闡明銀杏達(dá)莫注射液對(duì)缺氧-再?gòu)?fù)氧的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用，探討該藥在冠狀動(dòng)脈缺血再灌注損傷治療中的內(nèi)在機(jī)制，進(jìn)而能更好地為冠脈支架植入術(shù)后即阻塞血管再通后的血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用提供綜合性的理論基礎(chǔ)，更好地指導(dǎo)臨床用藥，為設(shè)計(jì)新的抗缺血再灌注治療方案及開(kāi)發(fā)有效的臨床治療藥物提供科學(xué)依據(jù)。
　　方

2、法：本實(shí)驗(yàn)采用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株（Human Vascular Endothelial Cells，HUVECs）體外傳代培養(yǎng)方法。將血管內(nèi)皮細(xì)胞分為3組，即①正常組：正常血管內(nèi)皮細(xì)胞；②缺氧-再?gòu)?fù)氧組：用1mmol/L連二亞硫酸鈉處理后再給予完全DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24h；③銀杏達(dá)莫注射液組：缺氧后再加不同濃度銀杏達(dá)莫注射液的完全DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)。通過(guò)倒置相差顯微鏡觀察和比較各組內(nèi)皮細(xì)胞在形態(tài)上的變化，用MTT法檢測(cè)細(xì)

3、胞吸光度值，采用酶聯(lián)免疫吸附的方法(ELISA)分別測(cè)定細(xì)胞上清液中的NO、MDA含量及SOD活性，并進(jìn)行相關(guān)比較。
　　結(jié)果：MTT比色法結(jié)果顯示：缺氧-再?gòu)?fù)氧組的OD值明顯降低，而正常組和銀杏達(dá)莫注射液組的OD值則明顯增高。正常組、銀杏達(dá)莫注射液組與缺氧-復(fù)氧組OD值有顯著差異（P＜0.05）。缺氧-復(fù)氧組組中的MDA含量增加，而NO含量降低。相反，正常組和銀杏達(dá)莫注射液組中MDA含量減少，而NO含量增高。正常組、缺氧-復(fù)氧組

4、及銀杏達(dá)莫注射液組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MDA、NO含量相比較均有明顯差異（P<0.01）。單純?nèi)毖?復(fù)氧組中的SOD活性明顯降低，正常組和銀杏達(dá)莫注射液組中的SOD活性則有所升高。正常組和銀杏達(dá)莫注射液組與單純?nèi)毖?復(fù)氧組中的細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的SOD活性具有明顯差異（P＜0.01），但正常組和銀杏達(dá)莫注射液組中的細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的SOD活性無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：銀杏達(dá)莫注射液對(duì)缺氧—再?gòu)?fù)氧損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作