先天性白內(nèi)障住院病人中TORCH病原檢測(cè)表達(dá)意義的評(píng)價(jià)性研究.pdf

1、研究背景:
　　先天性白內(nèi)障是一類嚴(yán)重影響兒童視覺健康的疾病，包括兩種類型，一種是出生后即存在晶狀體的渾濁，另一種是出生后1年內(nèi)再形成的晶狀體渾濁。大多數(shù)患兒需要手術(shù)治療，由于兒童生長發(fā)育的特殊性，手術(shù)后易發(fā)各種并發(fā)癥，在其特殊的視覺發(fā)育過程中，視力及視功能均受不同程度影響，成為眼科臨床治療的難題。因此，探究其發(fā)病原因和機(jī)制，以采取有效防范措施，降低其發(fā)病率，是眼科學(xué)的重要課題。近年來國內(nèi)外大多數(shù)研究者認(rèn)為，約有1/3的先天性白內(nèi)

2、障與遺傳因素有關(guān)，還有1/3病例的發(fā)病原因和環(huán)境因素特別是病毒（風(fēng)疹、麻疹、水痘、單純皰疹等）有關(guān)，另有1/3為機(jī)制不明的散發(fā)病例。小兒眼科學(xué)者普遍認(rèn)為在胚胎形成過程中，諸如病毒，寄生蟲等病原體的感染，對(duì)先天性白內(nèi)障的發(fā)病起著重要的影響。病毒作為基因突變的一個(gè)重要的誘發(fā)病原，可能導(dǎo)致基因的位移、重排或缺失等改變，突變結(jié)果產(chǎn)生致白內(nèi)障基因，特別在是胚胎形成期傳遞非正?；蛐畔ⅲ瑢?duì)先天性白內(nèi)障的形成可能起著重要的作用。細(xì)胞內(nèi)寄生的弓形蟲也會(huì)

3、影響正常巨噬細(xì)胞的功能，使宿主細(xì)胞產(chǎn)生凋亡，引發(fā)眼內(nèi)炎癥導(dǎo)致白內(nèi)障的發(fā)生。TORCH病原抗體檢測(cè)作為巨細(xì)胞病毒(CMV)、單純皰疹Ⅰ(HSVⅠ)和Ⅱ型病毒(HSVⅡ)、風(fēng)疹病毒(RV)和弓形蟲(TOX)等五類病原的抗體IgG及IgM測(cè)定，可以反映患兒是否在胚胎期曾經(jīng)遭受過病毒和寄生蟲的侵襲以及出生后的獲得性感染。我院常規(guī)開展門診相關(guān)患病兒童和住院白內(nèi)障及非白內(nèi)障兒童的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA法）檢測(cè)TORCH病原抗體。本研究通過白內(nèi)

4、障組與非白內(nèi)障組住院或門診患兒檢測(cè)出的TORCH抗體陽性率比較，試圖尋找TORCH病原感染與白內(nèi)障發(fā)生的相關(guān)性，根據(jù)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果來評(píng)價(jià)現(xiàn)行的TORCH檢測(cè)實(shí)際臨床意義，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)病毒和寄生蟲因素在先天性白內(nèi)障發(fā)生中所占的病因?qū)W份額，為進(jìn)一步研究先天性白內(nèi)障的發(fā)病機(jī)制提供更加合適的研究方向和發(fā)現(xiàn)更多的證據(jù)。
　　研究目的:
　　回顧性分析總結(jié)來自2006年5月～2013年9月間浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院，有完整血清TORCH病原

5、抗體（包括CMV、HSVⅠ和HSVⅡ、RV和TOX等五類病原）IgG及IgM檢測(cè)記錄的69例先天性白內(nèi)障患兒為研究組，與隨機(jī)抽樣的同期非白內(nèi)障住院患兒289例和新生兒151例進(jìn)行平行比較，并與2010年10月～2013年9月門診11963例有相關(guān)抗體檢測(cè)記錄的就診患兒進(jìn)行橫向比較，研究探討上述病毒和寄生蟲感染與先天性白內(nèi)障發(fā)生的相關(guān)性，評(píng)價(jià)在先天性白內(nèi)障患兒中進(jìn)行TORCH檢測(cè)的臨床意義，發(fā)現(xiàn)新的現(xiàn)象，探討更有價(jià)值的研究方法。
　

6、　研究對(duì)象與方法:
　　1.研究對(duì)象
　　1.1白內(nèi)障組
　　明確診斷的先天性白內(nèi)障兒童69例，均為入住兒童醫(yī)院需要手術(shù)治療的患兒，男33例，女36例，年齡1個(gè)月9天～11歲6個(gè)月，平均年齡19.57±22.164個(gè)月，其中單純白內(nèi)障的患兒36例，合并有眼球震顫、心臟病等其他系統(tǒng)疾病的33例;單眼白內(nèi)障患兒32例，雙眼白內(nèi)障患兒37例。所有患兒均有胸片，心電圖，雙眼、心臟及腹部B型超聲等檢查，人類免疫缺陷病毒(HIV)

7、及梅毒螺旋體特異性被動(dòng)血凝試驗(yàn)（TPHA）檢測(cè)陰性。已排除有明確家族白內(nèi)障遺傳病史的病例。
　　1.2對(duì)照組兩組
　　1.2.1平行對(duì)照組:
　　隨機(jī)抽樣的同期非白內(nèi)障住院患兒289例，其中男143例，女146例，年齡29天～13歲7個(gè)月，平均年齡17.71±27.731個(gè)月和新生兒住院患兒151例，男78例，女73例，年齡1天～28天，其中新生兒患兒有無同時(shí)伴發(fā)先天性白內(nèi)障情況不明確?；純杭膊≈邪ㄓ邢忍煨孕呐K病、先

8、天腦發(fā)育不良、癲癇、腎炎腎病、肝功能異常、病毒性腦炎、白血病、呼吸道及泌尿道感染等各類內(nèi)科外科病種。未發(fā)現(xiàn)明確的家族遺傳病史，有HIV和TPHA檢測(cè)記錄的病例均為陰性結(jié)果。
　　1.2.2橫向?qū)φ战M:
　　作為接近普通人群組趨勢(shì)的對(duì)照，取至2010年10月～2013年9月門診有相關(guān)電腦存檔檢測(cè)記錄的11963人次就診患兒，男7243例，女4720例，年齡1天～16歲11個(gè)月。年齡呈前兩組類似的偏態(tài)分布。有外傷、呼吸系統(tǒng)感染、

9、腎病、腦炎、腫瘤、先天性心臟病、先天畸形、內(nèi)分泌相關(guān)代謝性疾病等各科病種。家族遺傳病史和HIV、TPHA檢測(cè)記錄不明。
　　所有病例檢測(cè)報(bào)告均為TORCH檢測(cè)陽性或陰性結(jié)果，刪除所有報(bào)告為陽性可疑的病例。所有住院病歷均有家長簽署的知情同意書。
　　2.研究方法
　　采用回顧性設(shè)計(jì)，分組隨機(jī)配對(duì)研究的方法。
　　2.1臨床檢查:
　　所有入選白內(nèi)障均行常規(guī)眼部檢查，包括眼前段裂隙燈檢查、眼壓等檢查，托品酰胺滴

10、眼液散瞳白內(nèi)障形態(tài)、間接眼底鏡眼底檢查，雙眼、心臟及腹部B型超聲、胸片、心電圖等檢查。平行對(duì)照組中非新生兒患兒查詢病歷未見眼部明顯異常;新生兒因年齡太小，新生兒科醫(yī)生體檢困難等原因，無詳細(xì)眼科檢查記錄，故有無伴發(fā)白內(nèi)障情況不明確。橫向?qū)φ战M沒有眼部?？茩z查記錄，只截取門診電腦記錄診斷。
　　2.2實(shí)驗(yàn)室檢查:
　　2.2.1標(biāo)本采集
　　所有受檢對(duì)象均采集清晨空腹外周靜脈血1-2毫升，室溫靜置不超過8小時(shí)，預(yù)計(jì)超過8小

11、時(shí)才能試驗(yàn)的樣本則采集后即刻存放在2-10℃冰箱中，預(yù)計(jì)超過24小時(shí)后才能試驗(yàn)的樣本則采集后即刻于-20℃冰箱保存，所有樣本均在二天內(nèi)集中完成檢測(cè)。成批檢測(cè)。
　　2.2.2測(cè)定方法
　　采用ELISA法測(cè)定血清TORCH抗體IgG和IgM。試劑盒購自美國TrinityBiotech Plc公司，所有受檢者均用同一產(chǎn)地公司試劑，具體操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。
　　2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)使用SPSS1

12、9.0軟件包計(jì)算，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)、構(gòu)成比表示，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。年齡采用方差方程Levene檢驗(yàn)、均值方程的t檢驗(yàn)。性別構(gòu)成以及比較白內(nèi)障組和對(duì)照組的抗體表達(dá)抗性率差異采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)四格表資料的x2檢驗(yàn)。
　　研究結(jié)果:
　　1.比較白內(nèi)障組、平行對(duì)照非新生兒組的年齡、性別構(gòu)成等差異未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　2.白內(nèi)障組血清HSVⅡ-IgG陽性率為7.20％、IgM陽性率為1.40％，平行對(duì)

13、照的非新生兒組為2.10％、1.40％，兩組IgG及IgM陽性率差異未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　3.白內(nèi)障組HSVⅠ-IgG陽性率為10.10％、IgM陽性率為1.40％，平行對(duì)照的非新生兒組為9.00％和0.30％，兩組IgG及IgM陽性率差異未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　4.白內(nèi)障組RV-IgG陽性率為5.80％、IgM陽性率為1.40％，平行對(duì)照的非新生兒組為4.80％和1.40％，兩組IgG及I

14、gM陽性率差異未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　5.白內(nèi)障組TOX-IgG陽性率為0.00％、IgM陽性率為0.00％，平行對(duì)照的非新生兒組為0.30％和0.30％，兩組IgG及IgM陽性率差異未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。
　　6.白內(nèi)障組CMV-IgG陽性率為23.20％、IgM陽性率為14.50％，平行對(duì)照的非新生兒組為23.50％和14.20％，兩組IgG及IgM陽性率差異未見有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。

15、
　　7.非新生兒中平行對(duì)照組和和橫向?qū)φ战M的比較，HSVⅠ-IgG、HSVⅡ-IgG、TOX-IgG和IgM陽性率差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。RV-IgM、CMV-IgM陽性率差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但RV-IgG、CMV-IgG陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，平行對(duì)照組較高。
　　8.白內(nèi)障組與橫向?qū)φ辗切律鷥航M的比較中RV-IgG、CMV-IgG陽性率差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但HSVⅡ4gG的陽性率差異卻有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，白內(nèi)障組較高。其他TOR

16、CH抗體和平行對(duì)照組的結(jié)果相似，各抗體陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　9.新生兒和非新生兒的檢測(cè)結(jié)果比較，則發(fā)現(xiàn)HSVⅡ-IgG、HSVⅠ-IgG、CMV-IgG和HSVⅡ-IgM、HSVⅠ-IgM、CMV-IgM陽性率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，三種病毒的IgG抗體新生兒明顯增高而IgM抗體陽性率低與非新生兒;TOX-IgG新生兒較高但TOX-IgM陽性率沒有區(qū)別;RV-IgM非新生兒陽性率較高而RV-IgG未見差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

17、　　10.性別之間的陽性率有一些區(qū)別，表現(xiàn)為HSVⅡ-IgG、 HSVⅠ-IgG、CMV-IgG女孩較高但HSVⅡ-IgM、 HSVⅠ-IgM、CMV-IgM陽性率沒有差別，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　11.單眼或雙眼發(fā)病的先天性自內(nèi)障之間，以及單純性白內(nèi)障和伴有其他系統(tǒng)疾病的患兒之間TORCH抗體的檢測(cè)陽性率差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的結(jié)果。
　　研究結(jié)論:
　　1.本研究發(fā)現(xiàn)先天性白內(nèi)障患兒中HSVⅡ-IgG抗體檢測(cè)出陽性率較

18、高，提出:除風(fēng)疹病毒外，HSV也可能是導(dǎo)致先天性白內(nèi)障的TORCH歸屬病毒。
　　2.研究發(fā)現(xiàn)先天性白內(nèi)障兒童血清TORCH陽性率與其他不良妊娠相關(guān)疾病的結(jié)果相近，證實(shí)了研究組先天性白內(nèi)障兒童也應(yīng)是不良妊娠疾病中的一個(gè)重要組成部分，其發(fā)生可能與TORCH病原感染有關(guān)。
　　3.本研究中新生兒患兒HSVⅡ-IgG、 HSVⅠ-IgG、CMV-IgG、TOX-IgG抗體檢測(cè)陽性率較高，而代表出生后自身獲得性感染而出現(xiàn)的HSVⅡ-

19、IgM、HSVⅠ-IgM、CMV-IgM抗體卻較低，提示該類IgG抗體多數(shù)為母源性抗體的可能較大。也提示在新生兒早期篩查發(fā)現(xiàn)先天性白內(nèi)障并對(duì)其進(jìn)行TORCH檢測(cè)，更能發(fā)現(xiàn)與宮內(nèi)感染相關(guān)的流行病學(xué)線索。因此，本研究在先天性白內(nèi)障的病因?qū)W研究中有向?qū)宰饔谩?br>　　4.研究中還發(fā)現(xiàn)性別間存在著差異，女性患兒HSVⅡ、HSVⅠ及CMV的IgG抗體表達(dá)較高，提示這些抗體是否有某些特殊的生物學(xué)作用機(jī)制有待研究。
　　5.對(duì)單眼或雙眼白內(nèi)

20、障發(fā)生率的在TORCH表達(dá)的對(duì)照中，研究顯示無相關(guān)性，未能支持早期學(xué)者認(rèn)為先天性白內(nèi)障單側(cè)與雙側(cè)發(fā)病有某些不同病因的觀點(diǎn)。單純性白內(nèi)障和伴有其他系統(tǒng)疾病的患兒之間沒有差異，考慮病毒在同源組織中的致病過程可能有類似的機(jī)制過程。
　　6.血清TORCH的檢測(cè)簡便，對(duì)高危人群進(jìn)行擇期和選擇性的檢測(cè)，特別是在新生兒早期篩查中發(fā)現(xiàn)出的先天性白內(nèi)障患兒中進(jìn)行檢測(cè)，更能發(fā)現(xiàn)流行病學(xué)的線索，可作為兒童先天性白內(nèi)障的病因?qū)W檢測(cè)指標(biāo)。進(jìn)一步結(jié)合調(diào)查孕