G-2407-3鼻腔噴霧劑的研究.pdf

1、目的:本文以G-2407-3為模型藥物,根據(jù)該藥的理化性質、藥理作用和鼻腔給藥特點,制備一種使用方便、起效迅速、生物利用度高、安全性好的鼻腔給藥劑型,為該藥的臨床應用增加一種劑型選擇。
　　內容與方法:考察了pH值對G-2407-3穩(wěn)定性的影響以及給藥裝置的密閉性和噴量的準確性;通過離體羊鼻黏膜體外吸收實驗,以滲透速率比較評價了幾種促滲劑及其不同濃度下的促滲效果,選擇了最佳促滲劑及其用量;以離體蟾蜍上腭纖毛毒性實驗對幾種輔料進行了

2、毒性評價,并考察了pH值對纖毛運動的影響,用兔眼進行黏膜刺激性評價,結果為其鼻粘膜提供佐證;進行了G-2407-3鼻噴劑工藝研究,并建立了鼻腔噴霧劑的質量標準草案;又通過穩(wěn)定性研究考察了該制劑的包裝儲存條件,為包裝選擇提供依據(jù),并考察了其穩(wěn)定性。采用熱板法進行了小鼠的藥效學實驗,最后采用比格犬進行了藥代動力學和相對生物利用度研究。
　　結果:首先在G-2407-3的處方前研究中,建立了精密、靈敏、專屬性強的G-2407-3HPLC

3、測定方法,結合國內外上市的G-2407-3片劑規(guī)格,確定鼻噴劑的規(guī)格為25mg/100μL/噴。通過藥物溶液在不同pH條件下的穩(wěn)定性研究,確定處方的pH范圍5.5～8.0。接著對G-2407-3鼻腔給藥系統(tǒng)的處方與工藝進行了優(yōu)化。以羊鼻黏膜為動物模型,以滲透速率和累積滲透量為指標,通過鼻腔吸收體外實驗考察,發(fā)現(xiàn)了了三種吸收促進劑的促滲效果。結果顯示三種吸收促進劑均有促滲作用,其中以吸收促進劑A和B促滲效果最好,增滲倍數(shù)分別為5.2和4.

4、9倍;在此基礎上,又進一步考察了二者在不同濃度下的促滲效果,隨著促滲劑濃度的增加,增滲倍數(shù)也增加,但濃度與增滲倍數(shù)之間沒有線性關系,而是當濃度增加到一定值后,對主藥的促滲作用達到了飽和現(xiàn)象。吸收促進劑A和B二者的促滲效果相差不大,結合纖毛毒性實驗結果,發(fā)現(xiàn)A對纖毛的毒性要明顯小于B。故最終我們選擇2.5％的A作為G-2407-3鼻腔噴霧劑的吸收促進劑。由于G-2407-3鼻腔噴霧劑為多次給藥的制劑,參照文獻報道對噴霧劑的抑菌劑進行了篩選

5、,選擇0.3％三氯叔丁醇作為抑菌劑。優(yōu)化確定了制劑的處方及工藝,之后確定了G-2407-3鼻腔噴霧劑所采用的給藥裝置,并考察了給藥裝置的密閉性,在此基礎上完成了制劑的質控和穩(wěn)定性研究。
　　在對制劑安全性的研究中,研究了包括藥物、輔料、pH值及最終制劑對鼻黏膜的毒性。采用離體蟾蜍上顎黏膜對纖毛毒性的影響因素進行了考察,研究表明,隨G-2407-3濃度的增加,對纖毛毒性增加,并確定了該鼻噴劑應用HCl調節(jié)pH,防腐劑為0.3％三氯叔

6、丁醇。同時發(fā)現(xiàn)加入2.5％A后三氯叔丁醇的毒性減小,提示促滲劑 A對三氯叔丁醇的纖毛毒性具有一定的保護作用。250mg·mL-1的G-2407-3鼻噴劑對纖毛運動有一定影響,但毒性不大,經(jīng)生理鹽水淋洗后,纖毛均可恢復擺動,且擺動時間較長,說明對纖毛的毒性是可逆的。本文又考察了pH值對纖毛運動的影響,結果表明:pH值在4-8范圍內對纖毛損傷較小,可認為是安全的pH范圍。其次,采用了在體蟾蜍上顎黏膜法考察了制劑的在體毒性,實驗結果與離體法結

7、果基本一致,說明該制劑對纖毛的毒性是可逆的。為了更為準確地評價制劑的刺激性,選用兔眼模型考察G-2407-3鼻腔噴霧劑的鼻黏膜刺激性,是考慮到兔眼可以比較直觀的表現(xiàn)出刺激的癥狀,如流淚、充血等,而且實驗方便,通過此實驗為鼻腔的刺激性實驗提供佐證。本實驗選擇的動物模型為新西蘭大耳白兔,結果顯示該制劑對黏膜基本無刺激。根據(jù)以上安全性研究的結果,確定了G-2407-3鼻腔噴霧劑的毒性影響因素,并表明該制劑安全,對鼻黏膜無毒無刺激性。
　

8、　研究建立的質控標準,能較好的控制本劑型的質量,三批所制備的樣品質量良好。建立穩(wěn)定性分析方法,其方法準確、可靠、分解產(chǎn)物均不干擾本法對主藥的測定。初步穩(wěn)定性結果表明該制劑性能穩(wěn)定:影響因素試驗、加速試驗3個月和室溫長期留樣試驗3個月G-2407-3鼻腔噴霧劑的外觀、含量、pH值等均未發(fā)生明顯變化,其穩(wěn)定性研究有待進一步考察。
　　藥效學研究中分別對其進行量效關系和時效關系的研究,量效實驗結果表明,隨著給藥劑量的增大藥效會明顯增強,

9、且鼻腔給藥的起效快,同樣劑量下鼻腔給藥與灌胃混懸液相比,鼻腔給藥的藥效大于灌胃混懸液。經(jīng)統(tǒng)計學分析,兩種給藥途徑均有效且沒有差別,各個時間點指標值藥效差別有統(tǒng)計學意義,時效關系表明G-2407-3鼻腔噴霧劑起效比混懸液灌胃給藥快。
　　建立了測定G-2407-3比格犬血漿中藥物濃度的HPLC方法,對 G-2407-3片劑和鼻腔噴霧給藥后比格犬的血藥濃度進行了測定,并對其體內藥動學過程進行了分析,比較了兩種給藥途徑的達峰時間和生物利

10、用度。研究結果經(jīng)方差分析,tmax、AUC0-1440min和AUC0-∞在參比制劑和受試制劑之間均有顯著性差異(P<0.05)。G-2407-3鼻噴劑和片劑的體內過程均符合二室模型,Tmax為(17.50±8.66)min,比片劑快約2.6倍;Cmax為(15.42±4.34)mg·L-1,約是片劑的2倍;t1/2β為(686.29±504.06)min,其相對生物利用度為(175.98±35.04)％。研究結果表明鼻腔給藥生物利用度