不同幽門螺桿菌臨床菌株對(duì)人胃黏膜細(xì)胞系GES-1基因表達(dá)譜影響的研究.pdf

1、我國胃癌的發(fā)生率在各類惡性腫瘤中位居第二,是嚴(yán)重危害人民身體健康的疾病。20世紀(jì)80年代以來,在人群中具有較高感染率的幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)與胃癌的關(guān)系已受到廣泛關(guān)注。流行病學(xué)證實(shí),H.pylori慢性感染是導(dǎo)致胃癌的重要危險(xiǎn)因素,與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),感染人群患胃癌的危險(xiǎn)比非感染者高4倍。大多數(shù)研究表明在“性胃炎-胃粘膜萎縮-腸化生-異型增生一胃癌”這一癌變模式中,H.pylori可

2、能起著先導(dǎo)作用。1998年Watanabe等首次報(bào)道H.pylori感染的蒙古沙土鼠可發(fā)生胃癌,這是H.pylori感染可誘發(fā)胃癌的直接證據(jù)。1994年,世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)正式將H.pylori列為胃癌的Ⅰ類致癌原。但H.pylori引起胃癌的機(jī)制尚未完全闡明。
　　 胃癌的發(fā)生是一個(gè)多病因、多階段的過程,感染H.pylori后,其結(jié)局可能發(fā)生慢性胃炎,也可能發(fā)展為胃癌。提示不同的菌株可能對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞產(chǎn)

3、生不同的影響,導(dǎo)致不同程度的疾病發(fā)生。
　　 本實(shí)驗(yàn)選用臨床分離自胃癌、胃炎患者的菌株各10例分別和GES-1細(xì)胞以不同濃度比例共培養(yǎng),12h、24h和48h后分別收獲細(xì)胞,進(jìn)行MTT和流式細(xì)胞儀檢測(cè)。結(jié)果顯示分離自胃癌患者胃黏膜的H.pylori菌株較分離自胃炎患者胃黏膜的菌株對(duì)GES-1細(xì)胞在增殖方面的影響更具顯著性,低濃度菌液可不同程度地促進(jìn)細(xì)胞增殖,高濃度菌液則抑制細(xì)胞增殖活性,并且隨著時(shí)間延長(zhǎng),低濃度菌液促細(xì)胞增殖活性

4、逐漸升高,高濃度菌液對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用也越發(fā)明顯。不同疾病來源的H.pylori菌株均會(huì)引起胃黏膜上皮細(xì)胞凋亡率增加,但組間差異無顯著性。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)菌濃度的提高,H.pylori菌株促胃黏膜上皮細(xì)胞凋亡的影響越發(fā)顯著。
　　 分別挑選出對(duì)GES-1細(xì)胞的增殖影響最顯著和對(duì)細(xì)胞增殖影響最小的兩株H.pylori菌株,分別和IGES-1細(xì)胞共培養(yǎng),收獲細(xì)胞后提取RNA產(chǎn)物與全基因組表達(dá)譜芯片雜交后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果顯示H.

5、pylori感染GES-1細(xì)胞后引起胃黏膜上皮細(xì)胞基因表達(dá)譜廣泛地改變,這些差異表達(dá)基因與細(xì)胞周期、細(xì)胞骨架和運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)和能量代謝等過程有關(guān)。篩選出一些與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的基因,如ETS1、JUN、JUNB、CLDN1、CXCL2、IRAK2、NUPR1、STC2、TP53BP1、TNFAIP3、TRAF1、DIO2、ST13以及SR蛋白家族,發(fā)現(xiàn)差異表達(dá)基因參與了多條信號(hào)通路的組成,為下一步的基因表達(dá)驗(yàn)證和生