胚胎成纖維細(xì)胞支持的分化抑制培養(yǎng)體系對臍血造血細(xì)胞擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該文分二部分:第一部分胚胎成纖維細(xì)胞支持的分化抑制培養(yǎng)體系對臍血造血細(xì)胞擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)研究;目的:胚胎干細(xì)胞(ES)和核轉(zhuǎn)移胚胎干細(xì)胞(ntES)的擴(kuò)增培養(yǎng)需要恰當(dāng)?shù)姆只鸵种婆囵B(yǎng)體系,該體系主要由胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)單層與添加的促進(jìn)增殖抑制分化的細(xì)胞因子(SCF、LIF)構(gòu)成,能維持ES細(xì)胞在不分化的前提下大量增殖.基于造血干細(xì)胞(HSC)與ES細(xì)胞的生物學(xué)特征和擴(kuò)增培養(yǎng)的目的等方面存在共性,該研究設(shè)計了一種更符合HSC特性的分化抑制培養(yǎng)體

2、系,以達(dá)到體外擴(kuò)增HSC的目的,為造血干細(xì)胞移植提供更符合臨床需求的移植物和HSC擴(kuò)增方法.結(jié)論:人中期妊娠早期的流產(chǎn)胚胎能成功分離PHEF并制備飼養(yǎng)單層,但PHEF和PMEF的生物學(xué)特性存在差異.由鼠胚胎成纖維細(xì)胞(PMEF和STO)和PHEF構(gòu)建的異源及同源共培養(yǎng)體系能有效擴(kuò)增人臍血造血細(xì)胞,其中PHEF優(yōu)于PMEF,PMEF優(yōu)于STO.其擴(kuò)增作用與造血細(xì)胞、飼養(yǎng)細(xì)胞與外源細(xì)胞因子的相互作用有關(guān).初步觀察提示該擴(kuò)增體系有助于造血調(diào)控

3、研究、造血干細(xì)胞體外操作和臨床造血干細(xì)胞移植,但需進(jìn)一步研究證實(shí).第二部分臍血間充質(zhì)干細(xì)胞主長特征與 誘導(dǎo)為心肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究;目的:臍血中存在少量的間充質(zhì)干祖細(xì)胞,但對其增殖分化特性知之甚少,該研究旨在評估臍血中間充質(zhì)干祖細(xì)胞存在的頻率,了解臍血間充質(zhì)干祖細(xì)胞的增殖特點(diǎn).探討臍血間充質(zhì)干祖細(xì)胞用于心肌細(xì)胞再生的可行性,并尋找其最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)條件.結(jié)論:低血清DMEM培養(yǎng)液能維持臍血間充質(zhì)干祖細(xì)胞增殖分化能力.采用該文所提供的擴(kuò)增與誘導(dǎo)