金蓮花黃酮類化合物的提取工藝及體外抗氧化活性研究.pdf

1、金蓮花(Trollius chinensis Bunge)又稱旱金蓮，是毛茛科(Ranunculace-ae)金蓮花屬(Trollius spp.)的植物，屬于多年生草本植物，其主要成分為黃酮類和生物堿類，目前的研究結(jié)果表明，金蓮花具有抗菌、消炎、抗病毒、抗癌等作用。本文對金蓮花中總黃酮的提取工藝、黃酮類分離純化及體外抗氧化活性進行了系統(tǒng)的研究。
　　目的:研究金蓮花中黃酮類化合物的提取、分離純化及體外抗氧化活性。
　　方法

2、:對金蓮花植物總黃酮的提取工藝進行了研究，設計L9(34)正交試驗，以醇提物和水提物中出膏率和總黃酮含量為指標，確定乙醇提取的最佳工藝。本實驗中金蓮花總黃酮提取物經(jīng)大孔樹脂初步分離后，乙酸乙酯萃取，再采用制備高效液相色譜法進行單體分離。鑒定并測定其含量，對金蓮花中總黃酮的抗氧化活性進行了初步研究。
　　結(jié)果:水提取金蓮花的出膏率平均為44.938％，RSD為3.01％，總黃酮平均含量為7.714％，RSD為2.56％。乙醇提取金蓮

3、花的出膏率平均為43.694％，RSD為2.49％，總黃酮平均含量為14.142％，RSD為1.26％。水提取工藝和乙醇提取工藝的出膏率相近，但是從提取物總黃酮含量來說，乙醇提取工藝提取的黃酮總含量明顯高于水提取工藝提取的黃酮總含量。金蓮花總黃酮含量的提取工藝采用乙醇提取工藝較佳。乙醇提取法選取了乙醇濃度、提取時間、提取次數(shù)和乙醇用量倍數(shù)四個影響因素，采用了正交實驗方法優(yōu)化了提取工藝，進一步表明乙醇提取工藝具有操作簡便、穩(wěn)定性好、成產(chǎn)成

4、本較低等優(yōu)點，為金蓮花的進一步開發(fā)提供了參考依據(jù)。
　　AB-8大孔樹脂采用總黃酮提取液上樣量30 mL，收集70％乙醇洗脫液經(jīng)乙酸乙酯萃取后制備型高效液相色譜進樣量6mL，餾分收集得葒草苷、牡荊苷餾份，經(jīng)減壓濃縮至一定體積，真空冷凍干燥，即得葒草苷、牡荊苷單體，NMR波譜學方法鑒定葒草苷、牡荊苷實驗光譜數(shù)據(jù)與標準品一致。測定其含量達到98％以上。
　　本實驗用維生素C作為陽性對照，研究結(jié)果表明金蓮花黃酮對DPPH自由基IC

5、50:總黃酮IC50=6.30 mg·L-1，維生素C IC50=2.41 mg·L-1。金蓮花溶液的濃度不斷增加，吸光度值不斷減少，而清除率在不斷的增加，說明金蓮花總黃酮對自由基的清除率隨著劑量的不斷增加而增大。金蓮花黃酮對超氧陰離子自由基的抑制IC50:總黃酮IC50=36.8 mg·L-1，維生素C IC50=3.50 mg·L-1。金蓮花溶液的濃度不斷增加，吸光度值不斷減少，而清除率在不斷的增加，說明金蓮花總黃酮對自由基的清除率

6、隨著劑量的不斷增加而增大。金蓮花黃酮對羥基自由基作用的抑制IC50:總黃酮IC50=69.42 mg·L-1，維生素C IC50=5.90 mg·L-1。金蓮花溶液的濃度不斷增加，吸光度值不斷增加，而清除率在不斷的增加，說明金蓮花總黃酮對自由基的清除率隨著劑量的不斷增加而增大。
　　結(jié)論:本課題確定了金蓮花中總黃酮提取的最佳工藝應采用醇提法，對金蓮花進行了葒草苷和牡荊苷的單體純化及制備，該法靈敏度高，操作簡便，所得葒草苷和牡荊苷單