益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病大鼠胃動(dòng)力障礙的干預(yù)作用及其對(duì)胃腸激素及SCF-Kit信號(hào)系統(tǒng)的影響.pdf

1、目的:糖尿病胃病(Diabetic Gastropathy,DG)、糖尿病腎病(diabeticnephropathy,DN)是糖尿病(diabetic mellitus,DM)患者最常見的慢性并發(fā)癥,臨床上二者常常并發(fā)。DG是指以胃動(dòng)力低下為特點(diǎn)的臨床癥候群,其特征是在沒有胃機(jī)械性梗阻的情況下出現(xiàn)胃排空延遲,已有糖尿病腎病的DM患者DG發(fā)病率更高,嚴(yán)重影響DM患者生存質(zhì)量和預(yù)后,因此,探討DG的發(fā)病機(jī)制,尋求防治DG的有效方法具有重要

2、意義。DG的發(fā)生是多種因素綜合作用的結(jié)果,具有復(fù)雜的病理機(jī)制特點(diǎn),多年來國(guó)內(nèi)外學(xué)者不斷探索糖尿病胃病的發(fā)病機(jī)制及有效的治療方法,但到目前為止,其確切的發(fā)病機(jī)制尚未完全明了,尚未找到良好的治療方法和藥物?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療DG,主要是在控制高血糖、控制高血壓、低蛋白飲食及糾正脂代謝紊亂等DM基本治療的基礎(chǔ)之上,使用促胃腸動(dòng)力藥物,但臨床效果緩慢,且長(zhǎng)期應(yīng)用不良反應(yīng)較多。中醫(yī)藥治療糖尿病胃病具有多途徑、多靶點(diǎn)、低不良反應(yīng)等特點(diǎn),近年來臨床治療糖尿

3、病及其DG、DN等慢性并發(fā)癥取得良好療效,顯示出較大潛力和廣闊的應(yīng)用前景。在前期臨床實(shí)踐中,導(dǎo)師陳志強(qiáng)教授根據(jù)中醫(yī)“久病必虛”、“久病必瘀”病機(jī)學(xué)理論及“異病同治”的辨證論治理論,結(jié)合糖尿病臨床表現(xiàn)及糖尿病胃病和糖尿病腎病的病理、病機(jī)特點(diǎn),總結(jié)歸納DG的基本病機(jī)為“氣陰兩虛、癥積阻絡(luò)”,治療當(dāng)以益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)為主,結(jié)合多年的臨床用藥經(jīng)驗(yàn),擬定了以益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)為主的中藥復(fù)方制劑,其主要藥物有黃芪、丹參、鱉甲、地龍等,運(yùn)用該方在臨床上

4、治療糖尿病胃病及糖尿病腎病,取得了良好療效,為進(jìn)一步證實(shí)該方的治療作用,并探討其可能的作用機(jī)制,同時(shí)為中醫(yī)學(xué)“異病同治”辨證論治理論提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),進(jìn)行了本項(xiàng)研究。借助糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙動(dòng)物模型,觀察對(duì)糖尿病腎病大鼠胃動(dòng)力障礙的治療作用,同時(shí),觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠血清胃泌素、瘦素和血漿胰高血糖素水平,胃組織瘦素及其受體的表達(dá),胃組織超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平,胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞以及

5、SCF-Kit信號(hào)系統(tǒng)的影響,探討其可能作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病大鼠胃排空的治療作用
　　 健康雄性SD大鼠80只,按體重隨機(jī)分為對(duì)照組(Control)、模型組(Model)、中藥低劑量組(low dose treated)、中藥中劑量組(Middle dosetreated)、中藥高劑量組(High dose treated)。適應(yīng)性飼養(yǎng)

6、一周后,分別測(cè)定尿蛋白陰性后行左腎摘除術(shù)。2周后除對(duì)照組外,其余組大鼠腹腔注射1％STZ40mg/kg,72h后測(cè)血糖≥16.7 mmol/L,為DM成模標(biāo)準(zhǔn),約3周時(shí)間測(cè)定糖尿病大鼠24h尿蛋白定量≥30mg,為糖尿病腎病大鼠模型制備成功。造模成功后,中藥低、中、高劑量組大鼠分別給予中藥5.29g/(kg.d)、10.58g/(kg.d)、21.16g/(kg.d)灌胃,對(duì)照組及模型組給予等體積的生理鹽水灌胃,每日一次,共6周。于用藥

7、后第6周末,收集24小時(shí)尿液,留取血,分離血清,測(cè)定血糖、血清尿素氮、肌酐、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、膽固醇、甘油三酯;殺檢動(dòng)物,剖腹,結(jié)扎賁門和幽門,取出整個(gè)鼠胃,酚紅灌胃法檢測(cè)胃排空。
　　 2益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃腸激素的影響
　　 2.1益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠血漿瘦素(Leptin)及胃組織Leptin及其受體(OB-Rb)的影響
　　 2.1.1益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)

8、糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠血Leptin的影響
　　 同上方法復(fù)制糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠模型,于用藥第六周末留取血標(biāo)本,觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)DN胃動(dòng)力障礙大鼠血Leptin的影響。
　　 2.1.2益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃組織Leptin的影響
　　 同上方法復(fù)制糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠模型,于用藥第六周末留取胃組織標(biāo)本,觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)DN胃動(dòng)力障礙大鼠胃組織Leptin

9、的影響。
　　 2.1.3益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃組織瘦素受體OB-Rb的影響
　　 同上方法復(fù)制糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠模型,于用藥第六周末留取胃組織標(biāo)本,觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)DN胃動(dòng)力障礙大鼠胃組織OB-Rb的影響。
　　 2.2益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠血清胃泌素(Gastrin)的影響
　　 同上方法復(fù)制糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠模型,于用藥第六周末

10、留取血標(biāo)本,觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠血清Gastrin的影響。
　　 2.3益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠血清胰高血糖素(Glucagon)的影響
　　 同上方法復(fù)制糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠模型,于用藥第六周末留取血標(biāo)本,觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠血清Glucagon的影響。
　　 3益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃組織SOD活性、

11、MDA的影響
　　 同上方法復(fù)制糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠模型,于用藥第六周末留取胃組織標(biāo)本,觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃組織SOD活性及MDA含量的影響。
　　 4益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響
　　 同上方法復(fù)制糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠模型,于用藥第六周末留取胃組織標(biāo)本,觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)

12、胞超微結(jié)構(gòu)的影響。
　　 5益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃SCF-Kit信號(hào)途徑的影響
　　 同上方法復(fù)制糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠模型,于用藥第六周末留取胃組織標(biāo)本,觀察益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對(duì)糖尿病腎病胃動(dòng)力障礙大鼠胃組織中c-kit mRNA、SCF mRNA的影響。
　　 結(jié)論:
　　 1益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥能改善DN胃動(dòng)力障礙大鼠一般狀況,改善腎功能、肝功能,降低血糖、血脂,促進(jìn)大

13、鼠的胃排空。
　　 2 DN胃排空障礙大鼠存在胃腸激素紊亂,血清Leptin、GAS、Glucagon水平明顯升高;益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥可明顯降低DN胃排空障礙大鼠的血清Leptin、Glucagon水平,此可能為其改善糖尿病腎病大鼠胃排空的機(jī)制之一;而GAS與DN胃動(dòng)力障礙之間的關(guān)系以及與中藥改善胃排空作用是否相關(guān)尚不明確;益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥改善DN模型大鼠胃排空功能,其作用機(jī)制可能與其對(duì)DN模型大鼠胃組織Leptin基因及

14、OB-Rb表達(dá)的影響無關(guān)。
　　 3 DN胃動(dòng)力障礙大鼠存在抗氧化能力減低和氧化應(yīng)激增強(qiáng);益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥可明顯提高DN胃動(dòng)力障礙大鼠抗氧化能力,抑制其氧化應(yīng)激,可能為其改善DN胃動(dòng)力障礙大鼠胃排空的機(jī)制之一。
　　 4 DN胃動(dòng)力障礙大鼠胃粘膜及Cajal間質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷;益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥可能是通過改善DN胃動(dòng)力障礙大鼠胃粘膜及Cajal間質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷,進(jìn)而促進(jìn)DN胃動(dòng)力障礙大鼠的胃排空。