天維菌素類似物的分離鑒定及殺蟲(chóng)活性研究.pdf

1、天維菌素(Tenvermectin)是從基因工程菌Streptomyces avermitilis MHJ1011發(fā)酵液中分離得到的新一類16元大環(huán)內(nèi)酯類化合物?；钚詼y(cè)試表明，天維菌素與阿維菌素、伊維菌素和米爾貝霉素相比，對(duì)蚜蟲(chóng)、螨、鱗翅目類害蟲(chóng)和其它危害作物的害蟲(chóng)以及家畜寄生蟲(chóng)都具有更好的防治效果。鑒于該類化合物具有廣譜、高效、低毒等特點(diǎn)，被認(rèn)為是一種非常有前景的新一代農(nóng)藥和獸藥。本論文的研究?jī)?nèi)容包括:天維菌素產(chǎn)生菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的分離

2、鑒定;天維菌素的微生物轉(zhuǎn)化;所得化合物殺蟲(chóng)殺螨活性測(cè)定。
　　1、天維菌素產(chǎn)生菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的分離鑒定。將基因工程菌Streptomyces avermitilis MHJ1011的發(fā)酵液(30L)用工業(yè)乙醇浸泡后，經(jīng)過(guò)濾、萃取、濃縮等前處理得到270g油性浸膏。油性浸膏經(jīng)硅膠柱層析(100-200目)和高效液相色譜法(C18柱、C3柱)等進(jìn)行分離純化，得到了3個(gè)代謝產(chǎn)物，利用核磁共振、高分辨質(zhì)譜、紅外光譜和紫外光譜等波譜分析方法

3、對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，結(jié)果表明這3個(gè)化合物均為新的天維菌素類似物，將其分別命名為天維菌素C、天維菌素D和天維菌素E。
　　2、天維菌素的微生物轉(zhuǎn)化。將天維菌素A和天維菌素B作為底物，利用8株微生物菌株對(duì)其進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。經(jīng)薄層鑒定和高效液相色譜檢測(cè)分析，發(fā)現(xiàn)了2株對(duì)天維菌素具有轉(zhuǎn)化能力的菌株，其中紅色糖多孢菌Saccharopolyspora erythraea ATCC11635的轉(zhuǎn)化現(xiàn)象最為明顯，因此選取該菌株對(duì)天維菌素A和B

4、進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。轉(zhuǎn)化后的發(fā)酵液經(jīng)硅膠柱層析(100-200目)、凝膠柱層析(Sephadex LH-20)和高效液相色譜法(C18柱)等分離純化后得到兩個(gè)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。利用核磁共振、高分辨質(zhì)譜、紅外光譜和紫外光譜等波譜分析方法對(duì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明這兩個(gè)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物均為新化合物，分別命名為4"-O-glucosyl tenvernectin A和4"-O-glucosyl tenvermectin B。
　　3、化合物殺蟲(chóng)殺

5、螨活性測(cè)定。以松材線蟲(chóng)和朱砂葉螨為供試生物，測(cè)定了天維菌素C、天維菌素D和天維菌素E的生物活性。天維菌素C和天維菌素D對(duì)松材線蟲(chóng)24h的致死中濃度LC50分別為3.8156，4.1542mg/L，而天維菌素E對(duì)松材線蟲(chóng)幾乎無(wú)生物活性;天維菌素C、天維菌素D和天維菌素E對(duì)朱砂葉螨24h的致死中濃度LC50分別為0.0110，0.0105和0.0837mg/L。以松材線蟲(chóng)、小菜蛾、竹螟和朱砂葉螨為供試生物，測(cè)定了轉(zhuǎn)化產(chǎn)物4"-O-gluco

6、syl tenvermectins A和B的生物活性。轉(zhuǎn)化產(chǎn)物4"-O-glucosyl tenvermectins A和B對(duì)松材線蟲(chóng)24h的致死中濃度LC50分別為6.7984，5.7980mg/L;對(duì)小菜蛾48h的致死中濃度LC50分別為0.0534×103，0.0349×103mg/L;對(duì)竹螟48h的致死中濃度LC50分別為7.2568，6.1104mg/L;對(duì)朱砂葉螨24h的致死中濃度LC50分別為0.0156，0.0113mg