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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)建立輪狀病毒腹瀉模型小鼠,并給予茜草藤、烏梅、甘草組成的顆粒干預(yù),觀察茜草藤、烏梅、甘草顆粒對(duì)輪狀病毒腹瀉小鼠表現(xiàn)、腸粘膜病理改變及IgA含量、血清TNF-α、腸道NF-κB含量及緊密連接蛋白變化情況,研究茜草藤、烏梅、甘草顆粒對(duì)輪狀病毒(RV)腹瀉作用的機(jī)制。
方法:MTT方法檢測(cè)茜草藤、烏梅、甘草顆粒對(duì)MK2細(xì)胞毒性及對(duì)RV的體外抑制。將120只乳鼠隨機(jī)分為正常組、模型組和干預(yù)組,模型組和干預(yù)組小鼠經(jīng)口腔給予0.
2、15ml的RV液,正常組小鼠給予等量生理鹽水。造模后1天,干預(yù)組小鼠每日2次給予25mg/ml的茜草藤、烏梅、甘草顆粒溶液0.1ml,模型組及正常組給予等量生理鹽水。取小腸組織作病理、電鏡觀察,免疫組化技術(shù)檢測(cè)腸道緊密連接蛋白Occludin及ZO-1。ELISA方法檢測(cè)腸粘膜IgA、核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)、血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:1.在茜草藤、烏梅、甘草顆粒溶
3、液安全濃度范圍內(nèi),隨溶液濃度升高,RV感染的MK2細(xì)胞的存活率升高。
2.病理及電鏡改變:正常組:腸粘膜結(jié)構(gòu)正常;模型組:大量空泡變性,絨毛壞死不明顯,刷狀緣結(jié)構(gòu)整齊;干預(yù)組:空泡樣改變較模型對(duì)照組減輕,刷狀緣結(jié)構(gòu)整齊。
3.腸粘膜中IgA:第二至第五天正常組較模型組及干預(yù)組升高,第4天至第5天干預(yù)組較模型組升高;
4.血清TNF-α:模型組與干預(yù)組第1天起較正常組升高,第3天至第4天達(dá)高峰。干預(yù)組第3日至
4、第6日較模型組下降;
5.腸道NF-κB:模型組與干預(yù)組第1天起較正常組升高,第3天至第4天達(dá)高峰。第3日至第6日干預(yù)組較模型組下降。
6.緊密連接蛋白光密度:第一天,三組沒(méi)有顯著差異;第三天,模型組較干預(yù)組與正常組顯著下降;第六天模型組較正常組與干預(yù)組下降。
結(jié)論:1.茜草藤、烏梅、甘草顆??梢砸种芌V對(duì)細(xì)胞的破壞作用;促進(jìn)緊密連接結(jié)構(gòu)的恢復(fù),保護(hù)腸粘膜屏障;2.促進(jìn)腸粘膜IgA的分泌;3.抑制NF-κB
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