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文檔簡介
1、輪狀病毒(rotavirus,RV)感染腹瀉是引起世界范圍內(nèi)嬰幼兒重癥腹瀉的主要原因,在發(fā)展中國家每年有60萬嬰幼兒由于RV感染腹瀉引起脫水,甚至死亡。該疾病對嬰幼兒的健康,生長發(fā)育乃至生命都造成嚴(yán)重影響。RV引起腹瀉是通過擾亂腸道黏膜細(xì)胞的吸收,使得腸道微生態(tài)平衡失調(diào),腸道功能發(fā)生紊亂而造成的。腹瀉導(dǎo)致腸道菌群失調(diào),而菌群失調(diào)又誘發(fā)或加重腹瀉。因此理清腹瀉時腸道菌群狀況對預(yù)防和治療RV感染腹瀉意義深遠(yuǎn)。本研究通過對嬰兒糞便中微生物的分
2、析探討了RV病毒感染腹瀉嬰兒腸道微生態(tài)的變化,揭示了腸道微生態(tài)在嬰兒RV感染腹瀉疾病中的作用。
本試驗(yàn)以2011年1-3月間哈爾濱市兒童醫(yī)院確診的15例RV感染腹瀉嬰兒(RV腹瀉組)和15例健康嬰兒(對照組)為研究對象,利用試劑盒法提取嬰兒糞便DNA,利用調(diào)查問卷方式收集嬰兒生長發(fā)育和患病情況信息,采用細(xì)菌的16S rDNA V3區(qū)通用引物、乳酸桿菌屬專一性引物和雙歧桿菌屬專一性引物對糞便總DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)
3、行變性梯度凝膠電泳(DGGE)分析,利用Quantity One軟件對RV感染腹瀉嬰兒的腸道菌群進(jìn)行聚類和相似性分析,利用Shannon-Weaver指數(shù)對腸道菌群進(jìn)行生物多樣性分析,利用基因測序技術(shù)和Quantity One軟件對RV感染腹瀉嬰兒腸道微生物進(jìn)行定性和定量分析。
研究結(jié)果表明:RV腹瀉組和對照組的腸道優(yōu)勢菌群多樣性存在明顯差異(P<0.05),且RV腹瀉組的多樣性低于對照組,表明RV腹瀉對腸道菌群多樣性存在
4、一定影響。RV腹瀉嬰兒腸道中擬桿菌屬、梭菌屬、腸桿菌屬、屎腸球菌和大腸桿菌屬占優(yōu)勢。與對照組比,乳酸菌屬、雙歧桿菌屬和消化球菌屬在RV感染腹瀉嬰兒的腸道中不占優(yōu)勢,說明RV感染腹瀉后嬰兒腸道優(yōu)勢菌群的組成發(fā)生變化。
RV腹瀉組和對照組腸道乳酸桿菌屬的多樣性存在明顯差異(P<0.05),且RV腹瀉組的多樣性低于對照組,表明RV腹瀉對乳酸桿菌屬的多樣性存在一定影響。RV腹瀉組乳酸桿菌屬的組成為:短乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和發(fā)酵乳
5、酸桿菌。和對照組相比,嗜熱乳酸桿菌和植物乳酸桿菌不是RV腹瀉組腸道乳酸桿菌屬的優(yōu)勢種,說明RV感染腹瀉后嬰兒腸道菌種乳酸桿菌屬的組成發(fā)生了變化。
RV腹瀉組和對照組腸道雙歧桿菌屬的多樣性存在明顯差異(P<0.05),且RV腹瀉組的多樣性低于對照組,表明RV腹瀉對雙歧桿菌屬的多樣性存在一定影響。RV腹瀉組雙歧桿菌屬的組成為:短雙歧桿菌和青春雙歧桿菌。和對照組相比,嬰兒雙歧桿菌、長雙歧桿菌和短雙歧桿菌不是RV腹瀉組腸道雙歧桿菌
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