對(duì)苯二胺氧化產(chǎn)物與DNA相互作用研究.pdf

1、DNA與小分子之間的相互作用是當(dāng)前核酸研究的熱點(diǎn)之一，它在遺傳學(xué)，藥物設(shè)計(jì)，藥理學(xué)等方面有著廣泛的應(yīng)用前景。對(duì)苯二胺(PPD)是氧化型染發(fā)劑的主要成分，其是否存在危害尚未達(dá)成共識(shí)。本論文利用了原子力顯微鏡技術(shù)(Atomic force microscopy，AFM)探測(cè)DNA與PPD氧化產(chǎn)物之間的相互作用，并借助瓊脂糖凝膠電泳，紫外可見(jiàn)分光光度法，質(zhì)譜法進(jìn)行輔助分析。從納米和分子水平上闡述了DNA與PPD氧化產(chǎn)物之間可能的作用機(jī)理，預(yù)測(cè)

2、了二者之間可能存在的結(jié)合方式。 1．本論文首次利用AFM觀測(cè)了不同來(lái)源的DNA在加入不同濃度，不同氧化時(shí)間PPD時(shí)所產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)變化。由AFM所得的形貌圖結(jié)果推測(cè)PPD氧化產(chǎn)物能夠引起DNA產(chǎn)生凝集現(xiàn)象，DNA分子與PPD氧化產(chǎn)物可能存在靜電力作用，這一現(xiàn)象在已知的文獻(xiàn)中尚未見(jiàn)到過(guò)報(bào)導(dǎo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為其它關(guān)于PPD危險(xiǎn)性的研究提供了納米水平上的依據(jù)，并對(duì)今后的科學(xué)研究提供了一定的參考價(jià)值。 2．瓊脂糖凝膠電泳發(fā)現(xiàn)，隨著PPD氧

3、化產(chǎn)物的加入，質(zhì)粒DNA在4000 bp處熒光明顯增強(qiáng)，此現(xiàn)象與AFM相吻合。 3.紫外分光光度計(jì)中的光譜結(jié)果顯示：當(dāng)DNA加入時(shí)，PPD氧化產(chǎn)物的部分譜線產(chǎn)生了減色和紅移現(xiàn)象，說(shuō)明PPD氧化產(chǎn)物中的某種成分與DNA分子之間存在插入嵌合作用。 4．質(zhì)譜分析表明，PPD氧化產(chǎn)物很復(fù)雜，其主要的氧化物為Badrowski’s base(BB，m/z=319.3)。分析液相及薄層色譜分離的產(chǎn)物，得知DNA凝集可能是由BB水溶液