茶多酚抗腎臟缺血再灌注損傷作用的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、缺血再灌注損傷(Ischemia/Reperfusion Injury,IRI)是臨床上一種常見的病理生理現(xiàn)象,其中,大量自由基的產生是造成細胞損傷和功能損傷的首要因素。近年來,隨著影像技術的廣泛應用,早期腎癌診斷率明顯提高。針對早期腎細胞癌,采用保留腎單位手術(NSS)可以獲得與腎癌根治切除術同樣的療效。目前國際上有學者提出NSS理想患者應是:對側腎功能正常,無癥狀的偶發(fā)腫瘤大小在3.5cm以下并且是T1.T2期。如何減輕術中因腎缺血

2、及再灌注后所導致的腎實質及腎功能的損傷是目前臨床上亟待解決的重要問題。 目的:通過建立單側腎臟缺血再灌注損傷模型,探討靜脈內給予強效抗氧化劑茶多酚以抗腎缺血再灌注損傷的保護作用。 方法: 1、實驗分組實驗用SD大鼠30只,體重260±20g,隨機分為A、茶多酚高劑量組(TP100mg/kg),B、茶多酚低劑量組(TP50mg/kg),C、維生素C組(vitC200mg/kg),D、腎缺血再灌注組,E、假手術組,每

3、組6只。A、B、C3組于再灌注前10分鐘左股靜脈注射相應藥物,勻速靜注約1分鐘。 2、動物模型制作手術采用10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔內注射麻醉,取左側腰背部平行脊柱切口鈍性分離腰大肌以及與其粘連之脂肪,進入腹膜后間隙即可見左側腎臟,用血管鉗輕壓固定腎臟及腎蒂,上提腰大肌,平行脊柱可見腹主動脈,于腎蒂近腹主動脈部用玻璃分針分離出左腎動脈,無損動脈夾阻斷左腎動脈,同時開始記時,觀察腎臟顏色變成暗紅至暗黑色。阻斷左腎動脈45分

4、鐘后,移去血管夾,恢復腎動脈供血,觀察到腎臟在短時內由暗黑色逐漸轉變?yōu)轷r紅色(提示腎臟恢復血供)。 3、標本取材各組大鼠于24h后分別取左側腎臟,于腎門處正中橫斷,上半部立刻放于-77攝氏度冰箱凍存,備做組織勻漿。下半部放于10%甲醛固定,備做病理切片。 4、結果檢測(1)左腎組織SOD、MDA的活性及含量(2)光鏡下病理切片HE染色。 結果: 1、左腎組織SOD活性的變化腎組織SOD活性A組、B組、C組

5、、D組有逐漸降低的趨勢但是低于E組,與E組差異均有統(tǒng)計學意義,A組與D組比較差異有統(tǒng)計學意義,B組、C組與D組比較差異無統(tǒng)計學意義,A組與B組比較差異無統(tǒng)計學意義,與C組比較差異有統(tǒng)計學意義,B組與C組比較差異有統(tǒng)計學意義。 2、左腎組織MDA含量的變化腎組織MDA含量A組、B組、C組、D組有逐漸升高的趨勢且均高于E組,A組、B組及C組與E組比較差異無統(tǒng)計學意義,A組、B組、C組及E組與D組比較差異有統(tǒng)計學意義,A組、B組、C組

6、三組之間相互比較無統(tǒng)計學意義。 3、病理切片HE染色光鏡下左腎組織形態(tài)學變化HE染色E組大鼠腎小球、腎小管未見異常改變。D組腎小球未見異常改變,腎近球小管上皮細胞大片壞死,管腔擴張,管內可見脫落細胞碎片及蛋白樣管型,上皮細胞核固縮、碎裂,胞漿空泡變性壞死,各細胞間隙變大,腎間質充血水腫及炎性細胞侵潤。A組腎小球未見異常改變,腎近球小管管腔擴張,管內可見少量脫落細胞碎片,未見蛋白樣管型,上皮細胞腫脹,空泡樣變性,細胞間隙變大,腎間

7、質充血水腫及少量炎性細胞浸潤,B組、C組損害范圍及程度較A組重,較D組明顯輕。 結論: 1、本實驗可以成功建立保留對側腎臟,患側腎臟缺血再灌注動物模型,保證術后大鼠在24小時內保持良好的狀態(tài),完成我們所需要的指標檢測。 2、通過靜脈注射強效抗氧化劑茶多酚及維生素C可以減輕腎缺血再灌注時造成的腎損害,尤以茶多酚高劑量組(TP100mg/kg)明顯,其機制是通過引發(fā)機體內源性保護機制,上調SOD活性,直接或間接清除氧

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