脊髓缺血再灌注損傷的實驗研究.pdf

1、背景:
　　脊髓損傷發(fā)生率高，造成的后果嚴(yán)重，不僅給患者帶來生理上和心里上的巨大創(chuàng)傷，也為家庭及社會帶來許多問題。脊髓損傷后的損傷機(jī)制及進(jìn)展過程已被逐漸揭示，相關(guān)的藥物治療也在不斷發(fā)展，但依舊沒有一種有效而又廉價的藥物或是治療方法。
　　脊髓損傷過程中存在著眾多損傷機(jī)制，其中缺血再灌注損傷尤其受到關(guān)注，無論是在脊髓本身的創(chuàng)傷還是在其他的醫(yī)源性損傷中，都扮演著重要的角色。目前臨床上應(yīng)用較廣，并受到權(quán)威推薦的治療脊髓損傷的藥物是

2、MP和GM-1，但單獨(dú)使用往往帶來許多嚴(yán)重的并發(fā)癥，根據(jù)MP的作用特性和經(jīng)濟(jì)成本，結(jié)合維生素C在體內(nèi)的廣泛作用，聯(lián)合使用可能會帶來較好的治療效果，并能避免相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生。在臨床上還有部分患者（1.5％-3％）在接受了脊髓減壓手術(shù)后，可出現(xiàn)不明原因的進(jìn)行性脊髓功能喪失，目前多考慮與減壓局部脊髓缺血--再灌注損傷有關(guān)。觀察MP與維生素C聯(lián)合使用的治療效果，評估其療效，并研究慢性脊髓壓迫減壓后的缺血再灌注損傷程度，討論其損傷機(jī)制。
　

3、　目的:
　　1．探討小劑量甲基強(qiáng)的松龍與維生素C聯(lián)用對兔急性脊髓缺血再灌注損傷模型的保護(hù)作用。
　　2．探討缺血再灌注損傷是否為慢性脊髓壓迫癥減壓后不明脊髓功能喪失的致傷因素。
　　內(nèi)容和方法:
　　第一部分維生素C與小劑量激素聯(lián)用對急性脊髓缺血再灌注損傷的保護(hù)作用
　　成年新西蘭白兔144只，隨機(jī)平均分為6組：A組（陰性對照組）、B組（缺血再灌注組）、C組（小劑量MP組）、D組（Vc組）、E（大劑量MP

4、組）、F組（MP+Vc組）。夾閉腹主動脈25min后移除動脈夾造成缺血再灌注模型，隨即給予相應(yīng)的處理。于再灌注30min、6、12、24、48h每組各取4只動物，檢測丙二醛MDA、過氧化氫酶CAT、超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽過氧物酶GSH-Px表達(dá)水平；每組取4只動物于麻醉清醒即刻、再灌注24、48h按Tarlov評分系統(tǒng)行后肢運(yùn)動功能評分，并于48h評分完畢后取材行HE染色及TUNEL凋亡染色。
　　第二部分慢性脊髓壓迫減壓

5、后的缺血再灌注損傷
　　成年新西蘭白兔96只，隨機(jī)分為A組（假手術(shù)組），B組（缺血再灌注組），C組（慢性壓迫減壓組）。于0h、30min、6h、12h、24h，48h每組各取4只動物，檢測MDA、CAT、SOD、GSH-Px表達(dá)水平；各組于0h及48h各取4只動物取材行凋亡細(xì)胞計數(shù)。
　　結(jié)果:
　　第一部分：A、E、F組MDA、CAT、SOD、GSH-Px于再灌注30min、6、12、24h表達(dá)水平明顯低于B、C、D

6、組，且A、E、F3組間無明顯差異；Tarlov評分結(jié)果提示E（3.25±0.43）、F（3.50±0.50）組明顯優(yōu)于B（2.00±0.71）、C（2.50±0.50）、D（2.50±0.50）組；HE染色及TUNEL凋亡染色觀察E組（29.68±4.57）％與F組（30.50±4.40）％損傷程度及細(xì)胞凋亡指數(shù)相當(dāng)，均明顯低于其他組。
　　第二部分：B組MDA、CAT、SOD、GSH-Px于30min、6h、12h、24h表達(dá)水

7、平明顯高于A組；C組MDA、CAT、SOD、GSH-Px于各時間點(diǎn)表達(dá)水平均明顯高于A組，且C組組間各時間點(diǎn)表達(dá)水平無明顯區(qū)別；C組0h及48hTUNEL陽性細(xì)胞數(shù)量無明顯差異。
　　結(jié)論:
　　1．小劑量MP與Vc聯(lián)合應(yīng)用對急性脊髓缺血再灌注有明顯的保護(hù)作用，且效果與大劑量MP相當(dāng)，避免大劑量激素應(yīng)用發(fā)生并發(fā)癥的風(fēng)險。
　　2．慢性脊髓壓迫減壓后減壓局部并無明顯缺血再灌注損傷標(biāo)志，缺血再灌注并非減壓后脊髓功能喪失的原