葛根素抗肝缺血再灌注損傷作用機制的研究.pdf

1、目的：研究葛根素對肝臟缺血再灌注損傷的防治作用及作用機制。 方法：1.實驗分組：健康日本大耳白兔30只，隨機分為3組，每組10只。(1)對照組(C組)，僅行麻醉、開腹和游離肝葉等操作，不阻斷肝血流。(2)缺血再灌注組(IR組)，行肝門阻斷，缺血45分鐘后再灌注45分鐘。(3)葛根素組(Pur組)：缺血45分鐘后再灌注45分鐘，于缺血前10分鐘靜脈給予葛根素注射液(30mg/kg)。C組和IR各組則靜脈給予等量生理鹽水。余同IR組

2、。 2.采用Pringle氏法建立肝臟缺血再灌注模型。 3.取頸外靜脈血比較3組大白兔缺血前10分鐘、缺血45分鐘和再灌注45分鐘時ALT、SOD、GSH-Px、XO、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、NO、ET、TXB2、PGF1。及Ptmax、PtT、PtS。再灌注45分鐘時取肝左葉組織測定SOD、GSH-Px、XO、MDA、TXB2、PGF1α、ET、NO、ATP、ADP、AMP、EC、TAN，并在光鏡、電

3、鏡下觀察肝組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果：1.C組術(shù)前、缺血后45分鐘及再灌注后45分鐘血漿ALT濃度無明顯差異。IR組血漿ALT濃度在肝臟缺血45分鐘明顯升高，再灌注45分鐘后進一步升高(P＜0.01)。Pur組肝臟缺血45分鐘后血漿ALT濃度略有升高，但再灌注45分鐘血漿ALT濃度顯著低于IR組同期(P＜0.01)。 2.IR組血漿SOD、GSH-Px活力在肝臟缺血45分鐘以及再灌注45分鐘逐步降低，XO活力、MDA含量

4、明顯升高。Pur組血漿SOD、GSH-Px活力無明顯下降，XO活力、MDA含量無明顯升高，尤其再灌注45分鐘血漿SOD活力顯著高于與IR組同期(P＜0.01)，XO活力、MDA含量顯著低于IR組同期水平(P＜0.01). 3.IR組肝組織ATP、EC含量明顯低于C組(P＜0.01)，ADP、AMP含量顯著高于C組(P＜0.01)，兩組TAN無顯著性差異(P＞0.05)。Pur組ATP、EC含量均明顯高于IR組(P＜0.01)，A

5、DP、AMP含量顯著低于IR組(P＜0.05或P＜0.01)，ATP仍低于C組(P＜0.05)，TAN在兩組間無顯著性差異(P＞0.05)。 4.IR組血漿TNF-α、IL-1β、IL-6濃度在肝臟缺血45分鐘及再灌注45分鐘逐漸升高(P＜0.01)。Pur組肝臟缺血45分鐘血漿TNF-α，IL-1β，IL-6濃度略有升高，但再灌注45分鐘血漿IL-1β、IL-6濃度反而有所下降，血漿TNF-α，IL-1β，IL-6濃度均顯著低

6、于與IR組同期水平(P＜0.01或P＜0.05)。 5.IR組血漿ET濃度在肝臟缺血45分鐘及再灌注45分鐘逐漸升高(P＜0.05或P＜0.01)，血漿NO含量在肝臟缺血再灌注45分鐘后明顯下降(P＜0.01)。Pur組肝臟缺血45分鐘血漿ET濃度略有升高，NO含量明顯下降，再灌注45分鐘血漿ET濃度進一步升高，但顯著低于與IR組同期水平(P＜0.05)，NO含量顯著高于IR組同期水平(P＜0.05)。 IR組血漿TXB

7、2在肝臟缺血45分鐘及再灌注45分鐘均升高，血漿PGF1α在缺血再灌注45分鐘時顯著下降。Pur組血漿TXB2略有增加，PGF1α有下降，而且與IR組再灌注45分鐘時比較，血漿TXB2、PGF1α間均有顯著性差異(P＜0.05)。 IR組血漿Ptmax，PtS明顯增加，PtT顯著縮短，尤以再灌注45分鐘時最為顯著(P＜0.01或P＜0.05).Pur組血漿Ptmax，PtS，PtT雖增加，但均無顯著性差異(P＞0.05)；而且與

8、IR組再灌注45分鐘時比較，Ptmax，PtT，PtS間均有顯著性差異(P＜0.01或P＜0.05)。 6.血漿SOD、NO及肝組織ATP與血漿ALT之間呈顯著負相關(guān)；血漿XO、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、ET、TXB2、Ptmax及肝組織ADP，AMP與血漿ALT之間呈顯著正相關(guān)(P＜0.01)；血漿GSH-Px、PGF1α、PtS、PtT與血漿ALT呈無相關(guān)。 7.對照組肝臟組織結(jié)構(gòu)完整，肝細胞排列整齊

9、，無變性壞死，無中性粒細胞浸潤。缺血再灌注組肝細胞明顯膨大，核固縮，胞漿變透亮，呈水樣變性，線粒體空泡樣變，部分肝細胞崩解、壞死，伴中性粒細胞灶性浸潤。葛根素組肝組織損傷明顯減輕，肝小葉結(jié)構(gòu)基本正常，近中央靜脈部分肝細胞濁腫變性，無肝細胞壞死。 結(jié)論：葛根素對肝臟缺血再灌注損傷有較好的防治作用。其防治作用的機制：1、葛根素能降低黃嘌呤氧化酶(XO)活性，減少氧自由基的生成，并且能增強超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(

10、GSH-Px)等抗氧化酶的活性，清除氧自由基，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而有效減輕肝臟的缺血再灌注損傷。 2、葛根素能減少肝細胞ATP分解，增加ATP生成而延緩ATP的衰竭，加強肝細胞能量儲備，從而對缺血再灌注的肝細胞起到保護作用。 3、葛根素能抑制Kupffer細胞產(chǎn)生TNF-o，抑制內(nèi)源性IL-1β，IL-6的釋放，從而實現(xiàn)對肝臟缺血再灌注損傷的保護作用。 4、葛根素能調(diào)節(jié)NO/ET、TXA2/PGI2之間的平衡