Ang-1對糖尿病鼠腎血管內(nèi)皮層的影響.pdf

1、背景和目的：血管內(nèi)皮層是高血糖首當其沖的靶器官，蛋白尿出現(xiàn)便是糖尿病腎臟微血管結(jié)構(gòu)和功能異常的表現(xiàn)。業(yè)已證實Angiopoietin-1(Ang-1)具有促進血管穩(wěn)定、抗內(nèi)皮細胞凋亡、降低血管滲漏等生物學(xué)作用。本課題通過糖尿病大鼠模型，觀察糖尿病腎臟血管內(nèi)皮細胞連接蛋白(occludin)、內(nèi)皮細胞標志物(CD133)以及腎臟細胞凋亡情況，探討外源性給予Ang-1對糖尿病腎臟血管內(nèi)皮層的影響，旨在為糖尿病腎病的防治提供實驗依據(jù)。

2、　　 方法：構(gòu)建并鑒定高效表達Ang-1腺病毒載體，用鏈脲佐菌素誘導(dǎo)大鼠糖尿病腎病模型。設(shè)四組，即糖尿病組、Ang-1治療組、空白載體組和正常對照組。成模8周后于尾靜脈注射Ang-1腺病毒載體。分別于8、12、20、28周，檢測尿蛋白、常規(guī)腎臟病理，免疫熒光和Western blotting檢測腎組織occludin蛋白表達，免疫組化、熒光觀察細胞凋亡和CD133表達，并行相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果：(1) Ang-1治療組于2

3、8周時大鼠尿蛋白較同時點糖尿病組和空白載體組明顯降低(P<0.01)，但仍高于正常對照組；(2)occludin蛋白主要表達于腎小球、小動靜脈以及腎小管，三個模型組腎組織occludin表達水平均明顯降低(P<0.01)，但Ang-1治療組腎組織occludin表達水平明顯高于糖尿病組和空白載體組(P<0.01)，峰值在20周；(3)偶氮藍活體灌注后，糖尿病組和空白載體組藍染明顯強于Ang-1治療組，但后者仍強于正常對照組，藍染主要出現(xiàn)

4、在腎小球系膜區(qū)、腎小管上皮細胞、動靜脈血管壁上；(4)正常鼠腎組織少量CD133表達，三個模型組腎組織CD133表達明顯增強(P<0.01)，其中Ang-1治療組CD133表達增強尤其明顯(P<0.01)，主要見于腎內(nèi)微小血管內(nèi)皮層和腎小管；(5)20周時糖尿病腎組織細胞凋亡主要見于腎小管、微小動脈，Ang-1治療組細胞凋亡指數(shù)較糖尿病組和空白載體組明顯減少(P<0.01)，但仍高于正常對照組(P<0.01)；(6)尿蛋白排泄量與occ