MCM2和Ki-67在白血病細胞中的表達及意義.pdf

1、目的：探討微小染色體維持蛋白MCM2和核增殖抗原Ki-67在白血病細胞中的表達以及二者評價細胞增殖的關(guān)系，為白血病的發(fā)病機制、診斷治療和預(yù)后判斷提供依據(jù)。
　　 方法：實驗分為兩個部分：
　　 (1)培養(yǎng)白血病細胞系HL-60和K562，并以阿糖胞苷(Ara-C)進行藥物干預(yù)，觀察細胞生長曲線，通過MTT比色法檢測藥物干預(yù)的細胞抑制率。實驗分組：處于對數(shù)生長期的白血病細胞（A組）；處于饑餓狀態(tài)的非對數(shù)生長期的白血病細胞（

2、B組）；Ara-C藥物干預(yù)的白血病細胞（C組）；正常人外周血粒細胞（D組）和淋巴細胞（E組）。收集各組細胞，利用免疫組織化學(xué)方法檢測細胞中MCM2和Ki-67蛋白的表達，對細胞陽性表達率進行半定量分析。
　　 (2)搜集我院兒科2009年5月至2009年12月初發(fā)急性白血病患兒12例為實驗組，非惡性血液系統(tǒng)疾病患兒10例為對照組。在無菌條件下按常規(guī)操作穿刺，取髂后上棘骨髓1ml，肝素鈉抗凝，按常規(guī)方法分離骨髓單個核細胞，細胞涂片

3、后利用免疫組織化學(xué)方法檢測單個核細胞中的MCM2和Ki-67蛋白的表達，對細胞陽性表達率進行半定量分析。
　　 結(jié)果：(1)處于對數(shù)生長期的K562細胞和HL-60細胞MCM2蛋白的表達、Ki-67蛋白的表達均顯著高于對照組細胞(P＜0.05)。處于對數(shù)生長期的K562細胞株的MCM2與Ki-67蛋白表達存在正相關(guān)(r＝0.58，P＜0.05)，處于對數(shù)生長期的HL-60細胞株MCM2與Ki-67蛋白表達亦存在直線正相關(guān)(r＝0

4、.44，P＜0.05)。(2)處于饑餓狀態(tài)的K562細胞和HL-60細胞MCM2蛋白的表達、Ki-67蛋白的表達顯著高于對照組細胞(P＜0.05)及Ara-c藥物干預(yù)組(P＜0.05)，但較對數(shù)生長期細胞顯著降低(P＜0.05)。(3)Ara-C藥物干預(yù)的K562細胞和HL-60細胞MCM2蛋白、Ki-67蛋白表達較對數(shù)生長期細胞顯著降低(P＜0.05)。(4)急性白血病患兒的骨髓單個核細胞的MCM2，Ki-67蛋白表達均高于對照組患兒