基于DNA條形碼(ITS2)的絞股藍(lán)與其混偽品的分子鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、[目的]
　　探討基于ITS2序列的鑒定絞股藍(lán)與其混偽品的新方法，以確保該藥材的質(zhì)量以及臨床療效。
　　[方法]
　　1.利用PCR測(cè)序法，對(duì)樣品進(jìn)行ITS2片段擴(kuò)增并雙向測(cè)序。所得序列經(jīng)CodonCode Aligner拼接后，用CLUSTALX1.83軟件進(jìn)行多重序列比對(duì)及分析。
　　2.通過ITS2數(shù)據(jù)庫預(yù)測(cè)ITS2二級(jí)結(jié)構(gòu)。
　　3.用軟件MEGA4.0進(jìn)行K2P遺傳距離分析。
　　4.用最大

2、簡(jiǎn)約法(MP)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。
　　[結(jié)果]
　　1.絞股藍(lán)與其混偽品的ITS2序列存在相當(dāng)大的差異。
　　2.分析ITS2二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)與其混偽品在4個(gè)螺旋區(qū)的莖環(huán)數(shù)目、大小、位置以及螺旋發(fā)出時(shí)的角度均有明顯差異。
　　3.絞股藍(lán)最大種內(nèi)K2P(Kimura-2-parameter)遺傳距離遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于其與混偽品的種間K2P遺傳距離。
　　4.由所構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹圖可以看出，絞股藍(lán)與其混偽品可明顯分開。

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