低氧誘導因子在過度訓練致急性腎損傷中的表達及其對紅細胞生成素調(diào)控作用的研究.pdf

1、目的： 過度訓練可引起機體的損傷，如何防治運動引起臟器損傷是目前運動醫(yī)學、軍事醫(yī)學和臨床醫(yī)學關注的重大課題。本研究通過讓大鼠游泳至力竭，建立過度訓練致急性腎損傷(overtraining induced acute kidney injury，OTLAKI)模型。研究大鼠力竭后不同時間腎臟病理、腎組織低氧誘導因子(hypoxia inducible factor-1α HIF-1α)、促紅細胞生成素(erythropoietin

2、 EPO)表達及血清EPO濃度的變化及其相互關系，觀察了山莨菪堿對上述變化的影響，皆在加深對OTIAKI發(fā)病機制的認識，為臨床OTIAKI的防治提供新的理論依據(jù)。 方法： 1.分組雄性Wistar大鼠36只，體重200-220g，隨機分為安靜對照組(CN組)；力竭運動后即刻組(ESI組)；力竭運動后6小時組(ES6h組)；力竭運動后24小時組(ES24h組)；力竭運動后6小時+山莨菪堿組(AD6h組)；力竭運動后24小

3、時+山莨菪堿組(AD24h組)。 2.采用大鼠游泳至力竭建立過度訓練致大鼠急性腎損傷動物模型。各實驗組大鼠于實驗前一天適應性游泳30分鐘，第二天再次放于水中，游泳直到力竭。AD6h組、AD24h組大鼠在入水前10分鐘于腹腔注射山莨菪堿(10mg/kg)。 3.取材力竭后即刻組大鼠于發(fā)生力竭后立刻使用乙醚麻醉，麻醉理想后于腹部正中切開。先于門靜脈采血，注入抗凝管待測；后摘取雙腎，置入4℃4％多聚甲醛中固定。其余各實驗組也于

4、相應時間運用同樣的方法取材。 4.制作病理切片，HE染色，光鏡下觀察各組大鼠腎病理改變。 5.應用酶聯(lián)免疫(ELISA)及免疫組化法檢測大鼠力竭后不同時間腎組織低氧誘導因子及促紅細胞生成素的表達及血清EPO濃度。 結(jié)果： 1.力竭即刻組和6小時組大鼠腎組織在光鏡下有輕微缺血性改變，力竭后24小時可以觀察到部分腎小管上皮刷狀緣脫落，還可見浸潤細胞。山莨菪堿組大鼠在力竭后6小時及24小時腎組織結(jié)構在光鏡下均未

5、發(fā)現(xiàn)明顯異常。 2.正常大鼠腎組織HIF-1α表達很少，力竭后即刻組大鼠腎臟組織中HIF-1α與對照組比較明顯增高(P<0.01)；力竭后6小明繼續(xù)增高(P<0.01)；力竭后24小時腎臟組織中HIF-1α比力竭后6小時有所降低，但仍明顯高于對照組(P<0.01)。與單純力竭組比較山莨菪堿6小時組大鼠腎臟組織中HIF-1α明顯增高(P<0.01)，山莨菪堿24小時組大鼠則無明顯改變(P>0.05)。 3.正常大鼠腎臟表達

6、EPO，力竭后即刻組大鼠腎臟組織中EPO與對照組比較明顯增高(P<0.05)；力竭后6小時繼續(xù)增高(P<0.01)；力竭后24小時腎臟組織中HIF-1α比力竭后6小時有所降低，但仍明顯高于對照組(P<0.01)。與單純力竭組比較山莨菪堿6小時組大鼠。腎臟組織中EPO明顯增高(P<0.05)，山莨菪堿24小時組大鼠則無明顯改變(P>0.05)。 4.力竭后即刻組大鼠血清中EPO濃度與對照組比較明顯增高(P<0.01)，力竭后6小時

7、繼續(xù)增高，并達到最高峰(P<0.01)，力竭后24小時血清EPO濃度比力竭后6小時有所下降，但仍高于對照組(P<0.01)。力竭后山莨菪堿組大鼠血清中EPO的表達較對照組增加(P<0.01)。 結(jié)論： 1.力竭后即刻組大鼠腎組織HIF-1α及其下游基因EPO表達增強，血清中EPO濃度也增高，力竭后6小時達高峰，腎組織結(jié)構變化輕微，這可能是過度訓練大鼠腎臟代償性保護的重要機制。力竭后24小時大鼠腎組織HIF-1α及EPO表

8、達比力竭后6小時組均有不同程度下降，血漿。EPO濃度也下降，此時腎組織結(jié)構有明顯損傷，提示力竭后24小時大鼠腎臟自身代償性保護機制逐漸減弱，進而引起急性腎損傷。 2.應用山莨菪堿后大鼠腎組織HIF-1α及其下游基因EPO表達增強，血清中EPO濃度也增高，腎組織結(jié)構未發(fā)現(xiàn)明顯改變。提示山莨菪堿可通過提高腎組織HIF-1α及其下游基因EPO的表達以及血清EPO的濃度，進而對過度訓練大鼠起到腎臟保護作用，這可能是山莨菪堿防治過度訓練致