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文檔簡介
1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文慢性紫外線損傷后人體皮膚組織蛋白酶K的活性變化姓名:葉張章申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師:賴維20100526中山大學(xué)碩士學(xué)位論文慢性紫外線損傷后人體皮膚組織蛋白酶K的活性變化方法1研究對象:納入志愿者8例,其中男4例,女4例,年齡范圍2126歲,平均年齡2404歲,皮膚光生物學(xué)類型為III型或lV型(Fitzpatrick分類)。受試者既往無日光性皮膚病史或光過敏史,近1月無全身或近2周無局部使用光
2、敏感性藥物,局部皮膚無外傷及皮疹,實驗期間保證實驗部位避免日曬及使用光敏性藥物。本課題已取得所有志愿者知情同意及倫理委員會批準(中大附三醫(yī)倫[2009122號)。2方法:21在非曝光部位皮膚(上臀部)行慢性SSR誘導(dǎo)。日光模擬紫外線(30%UVA70%UVB,光譜為290400nm)每天以1MED量照射隨機一側(cè)上臀部皮膚,連續(xù)5天/周,共6周(SSR誘導(dǎo)組)。另一側(cè)上臀部皮膚作為正常對照組,不作誘導(dǎo)處理。22觀察是否成功誘導(dǎo)慢性光損傷處
3、理前后拍照,作皮膚外觀評估;最后一次誘導(dǎo)后72小時取SSR誘導(dǎo)組及正常對照組皮膚組織作HE染色,鏡下觀察組織學(xué)改變。23組織蛋白酶K活性檢測取兩組皮膚組織制備組織勻漿液,以人工合成的二肽化合物乙酰亮氨酰精氨酰氨甲基香豆素為底物,通過熒光酶標儀檢測組織蛋白酶K分解產(chǎn)物7氨基_4甲基香豆素釋放的熒光,以定量測定組織蛋白酶K的特異活性。3統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSSl70統(tǒng)計軟件進行配對樣本t檢驗分析,顯著性檢驗標準為P005。結(jié)果1SSR誘導(dǎo)組皮
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