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1、目的:1.建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)分離培養(yǎng)體系。 2.研究神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素-3(NT-3)及NSCs聯(lián)合移植對(duì)缺氧缺血性腦病(HIE)大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)及NT-3對(duì)移植NSCs分化的影響,并探討其可能機(jī)制。 方法:取新生24小時(shí)內(nèi)的wistar大鼠,從海馬中分離神經(jīng)細(xì)胞,進(jìn)行培養(yǎng)、鑒定。用出生7目齡的wistar大鼠制作缺氧缺血性腦損傷(HIBD)的動(dòng)物模型,7天后進(jìn)行移植。將實(shí)驗(yàn)大鼠隨即分為5組:正常組、模型組、假移植
2、組、NSCs移植組、NT-3及NSCs聯(lián)合移植組,每組12只。移植部位為損傷同側(cè)側(cè)腦室。4周后進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn),取腦組織進(jìn)行免疫組化及免疫熒光檢查。 結(jié)果:從新生鼠海馬中成功培養(yǎng)出NSCs,培養(yǎng)條件下呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),形成神經(jīng)球,絕大多數(shù)的細(xì)胞表達(dá)NSCs的標(biāo)志物神經(jīng)巢蛋白(nestin)。NT-3及NSCs移植組大鼠的學(xué)習(xí)能力、記憶能力及肢體功能與NSCs移植組相比有明顯提高,差異具有顯著性(p<0.05)。其N(xiāo)SCs分化成神經(jīng)元的
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