神經(jīng)干細(xì)胞移植治療缺血性腦卒中后遺癥的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：腦血管病是危害人類健康的三大疾病之一，也是當(dāng)今我國(guó)重點(diǎn)攻關(guān)的科技問(wèn)題之一。腦卒中發(fā)病率高、預(yù)后差，嚴(yán)重地危害著人們的身體健康。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們對(duì)生命質(zhì)量的要求越來(lái)越高，因此，如何改善病人的神經(jīng)功能預(yù)后是人們面臨的急需解決的問(wèn)題之一。胚胎腦組織細(xì)胞一直因受倫理、來(lái)源有限、保存困難、異質(zhì)性等缺點(diǎn)的限制，難以實(shí)現(xiàn)理想的治療效果。神經(jīng)干細(xì)胞的研究是當(dāng)今神經(jīng)科學(xué)研究的一大熱點(diǎn)。 自從1992年Reynolds和Weiss

2、從成年大鼠海馬中分離出神經(jīng)干細(xì)胞以來(lái)，神經(jīng)干細(xì)胞移植給修復(fù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷帶來(lái)了嶄新的思路和廣闊的前景。神經(jīng)干細(xì)胞的多分化潛能，使人們聯(lián)想到用其修復(fù)腦卒中的神經(jīng)損害來(lái)改善神經(jīng)功能。神經(jīng)干細(xì)胞在體外簡(jiǎn)單條件下可維持快速擴(kuò)增約300天，并且能高效轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定表達(dá)外源性基因。另外，經(jīng)長(zhǎng)期低溫冷凍保存復(fù)蘇后仍具有多分化能力。神經(jīng)干細(xì)胞的特點(diǎn)克服了胎腦組織移植的缺點(diǎn)。業(yè)已證明在成年腦內(nèi)存在一定數(shù)量的神經(jīng)干細(xì)胞以休眠、不增殖狀存活，并受中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)

3、控當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞微環(huán)境改變時(shí)，神經(jīng)干細(xì)胞被激活。在腦缺血性損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)損傷周?chē)鷧^(qū)神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)陽(yáng)性，提示神經(jīng)干細(xì)胞參與了機(jī)體損傷反應(yīng)。這種內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞啟動(dòng)的自發(fā)反應(yīng)是有限的，而外源性的神經(jīng)干細(xì)胞可以對(duì)此反應(yīng)起促進(jìn)和補(bǔ)充作用。 目的：本研究采用神經(jīng)系統(tǒng)評(píng)分(NSS評(píng)分)的方法對(duì)移植了神經(jīng)干細(xì)胞的缺血性腦卒中大鼠模型進(jìn)行NSS評(píng)分，以評(píng)價(jià)神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)中大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)的影響；并通過(guò)免疫熒光的方法觀察移植的神經(jīng)干細(xì)

4、胞在大鼠腦內(nèi)的形態(tài)整合與功能替代以及缺血灶區(qū)是否有神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志nestin陽(yáng)性表達(dá)。確定神經(jīng)干細(xì)胞移植治療缺血性腦卒中大鼠模型的最佳時(shí)機(jī)，為下一步臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 結(jié)果與結(jié)論： 1，胚胎大鼠端腦組織內(nèi)有能夠自我復(fù)制和多分化潛能的神經(jīng)干細(xì)胞，由它形成的神經(jīng)干細(xì)胞能夠耐受多次體外傳代。 2，免疫組織化學(xué)可鑒定神經(jīng)干細(xì)胞及其分化能力。 3，利用栓線法成功建立了大鼠短暫性腦缺血模型(tMCAO)。