EPCR基因6936A-G多態(tài)性和深靜脈血栓相關(guān)性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、深靜脈血栓形成(Deep venous thrombosis,DVT)是一種常見(jiàn)病和多發(fā)病,隨著生活水平提高和老齡化社會(huì)的到來(lái),血栓性疾病呈上升趨勢(shì)。在西方國(guó)家中DVT年發(fā)病率占總?cè)丝诘那Х种?,在美?guó)DVT的年發(fā)病率超過(guò)25萬(wàn)人次,我國(guó)對(duì)DVT的發(fā)病率還沒(méi)有進(jìn)行完整的流行病學(xué)調(diào)查,但近年來(lái)發(fā)病率有逐漸上升趨勢(shì)。 目前,DVT已被認(rèn)為是一種多基因性疾病。其中內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(endothelial cell protein C

2、 receptor,EPCR)是近年來(lái)的一個(gè)研究熱點(diǎn)。EPCR主要表達(dá)在大血管內(nèi)皮細(xì)胞表面,通過(guò)凝血酶—血栓調(diào)節(jié)素(thrombomodulin,TM)復(fù)合物增進(jìn)蛋白C(protein C,PC)/活化蛋白C(activated protein C,APC)活性,大大提高PC的活化率。目前為止已發(fā)現(xiàn)EPCR存在多種基因突變或多態(tài)性,從而改變了EPCR的表達(dá)與功能。H3單倍體即為第6936位核苷酸A/G是研究較多的一個(gè)單核苷酸多態(tài)性,在國(guó)

3、內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。本課題擬通過(guò)分析DVT患者EPCR基因6936A/G多態(tài)性和血漿可溶性EPCR(soluble EPCR,sEPCR)水平的相關(guān)性,探討EPCR基因在DVT中可能的作用。 研究對(duì)象:為本院就診的65例DVT患者和71例性別、年齡與之匹配的健康體檢者。取外周血,離心后用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)定量測(cè)定血漿sEPCR水平;提取血細(xì)胞中的DNA,用合成的特異性引物(上游引物5'GCTTCAGTCATTGGTA

4、AAC 3',下游引物5'TCTGGCTTCACAGTGAGCTG 3’)進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng),得到目的片段EPCR基因315bp。2%凝膠電泳分離擴(kuò)增產(chǎn)物后,回收純化目的片段,送至生物公司直接測(cè)序,分析EPCR基因第6936位點(diǎn)的多態(tài)性。 結(jié)果顯示:在正常對(duì)照組中,AG基因型組血漿sEPCR水平明顯高于AA基因型組(0.97±0.32pg/ml vs.0.61±0.24pg/ml,P<0.01),在DVT組亦得到類似的結(jié)果(0.8

5、7±0.21pg/ml vs.0.50±0.18 pg/ml,P<0.01)。DVT組的血漿sEPCR水平明顯高于正常對(duì)照組(0.68±0.32 pg/ml vs.0.54±0.22 pg/na,P<0.05)。DVT組AG基因型頻率明顯高于正常對(duì)照組(P<0.05),從基因型頻率明顯低于正常對(duì)照組,GG基因型頻率相當(dāng)。AG基因型與從基因型比較患DVT的危險(xiǎn)性O(shè)R=2.75,95%可信區(qū)間為1.04-7.30(P<0.05)。

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