靜脈血栓栓塞患者組織因子啟動子-1208I-D基因多態(tài)性與組織因子抗原及活性的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：了解組織因子(TF)啟動子-1208I/D基因多態(tài)性在靜脈血栓栓塞(VTE)患者的表達，分析該基因多態(tài)性與VTE發(fā)病的相關(guān)性；測定血漿TF抗原及活性水平，探討TF抗原及活性與該基因多態(tài)性的關(guān)系。從基因水平進一步研究VTE的發(fā)病機制。 方法： 1．標本采集患者來源于山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院血管乳腺科、呼吸科和急診科2006年3月至2007年7月住院及門診患者，其中DVT96例，男54例，女42例，平均年齡42.81±16

2、.45歲；PTE14例，男6例，女8例，平均年齡51.44±18.24歲。對照組均來自我院體檢中心健康體檢者共59例，男31例，女28例，平均年齡45.2±17.31歲。 2．基因組DNA抽提按酚—氯仿的方法提取標本中單個核細胞基因組DNA。 3．PCR擴增及產(chǎn)物分析采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)及瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢測TF啟動子-1208I/D基因多態(tài)性，根據(jù)電泳條帶區(qū)分各研究對象的基因型，并統(tǒng)計各基因型頻率。 4

3、．基因測序?qū)Σ糠諨/D和I/I純合子標本進行基因測序，驗證兩種等位基因的存在。 5．采用ELISA法和發(fā)色底物法分別測定55例DVT病例組及28例對照組血漿TF抗原及活性，分析各基因型之間抗原及活性的相關(guān)關(guān)系。 6．統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析。用基因計數(shù)方法計算各組基因型頻率和等位基因頻率。計量資料用(x)±s表示，兩組均數(shù)比較采用t檢驗；計數(shù)資料采用x2檢驗。各組間三種基因型的抗原、活性比較用多因素

4、方差分析。p＜0.05有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果： 1．TF啟動子-1208位點基因變異為18bp堿基(—AGCTAAACGAGATATGTA—)的插入/缺失(insertion/deletion)，存在D/D、I/D、I/I三種基因型?；蛐头植荚趯φ战M分別為D/D型67.8％，I/D型25.4％，I/I型6.8％；DWT組分別為D/D62.5％，I/D29.8％，I/I8.3％；PTE組分別為D/D57.1％，I/D35.

5、7％，I/I7.1％。D等位基因頻率和Ⅰ等位基因頻率在對照組分別為80.5％、19.5％，DVT組分別為77.1％、22.9％，PTE組分別為75.0％、25.0％。p值均＞0.05。 2．TF抗原在VET組和對照組分別為22.745±11.411(pg/mL)和24.012±11.697(pg/mL)，p=0.637；TF活性分別為4.469±4.630(pM)和1.633±0.648(pM)，p＜0.001。 3．V

6、ET組中D/D、I/D和I/I三種基因型TF抗原水平分別為21.437±9.814(pg/mL)、20.816±10.998(pg/mL)和38.063±13.182(pg/mL)；對照組中分別為21.289±9.856(pg/mL)、23.178±7.125(pg/mL)和41.667±18.950(pg/mL)。VET組中D/D、I/D和I/I三種基因型TF活性比較F=2.129，p=0.129；在對照組為F=0.212，p=0.8