樺褐孔菌深層培養(yǎng)及其多糖提取工藝和抗腫瘤活性研究.pdf

1、樺褐孔菌(Inonotus obliquus或Fuscoporia obliqua)屬于多孔菌科褐臥孔菌屬，是一種十分珍稀且名貴的藥用真菌，在俄羅斯又被稱為Chaga。樺褐孔菌對各種癌癥、心臟病、糖尿病、艾滋病等均有很好的療效。 常生于白樺、銀樺、榆樹和赤楊等活立木的樹皮下的野生樺褐孔菌資源日益枯竭，人工培養(yǎng)研究迫在眉睫。本文研究了樺褐孔菌液體發(fā)酵適合的碳源、氮源、碳氮比及其所需的微量元素和維生素。結(jié)果如下：菌絲生長的最適無機氮

2、源為磷酸氫二銨；最適有機氮源為黃豆粉；最適碳源為葡萄糖；最適碳氮比為20：1；Mn元素有促進(jìn)生長的作用；最適合的維生素為VB1。以菌絲體干重為指標(biāo)，通過L9(34)正交試驗，篩選出樺褐孔菌菌絲體液體培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方是：葡萄糖20 g/L、黃豆粉30 g/L、KH2PO43 g/L、MgSO4·7H2O0.7 g/L、VB10.005 g/L，在26℃下培養(yǎng)15 d菌絲產(chǎn)量達(dá)到0.794 g/100 mL。 采用苯酚-硫酸法測

3、定多糖含量以總多糖含量為指標(biāo)，通過L9(33)正交試驗，對熱水浸提法的樺褐孔菌菌絲體多糖提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。樺褐孔菌多糖熱水浸提法的最佳工藝為：料水比為1：10，浸提溫度為100℃，提取時間為3h。此工藝下樺褐孔菌總多糖含量達(dá)到4.04％。 通過構(gòu)建小鼠S180荷瘤模型對樺褐孔菌多糖進(jìn)行抗腫瘤作用的研究。樺褐孔菌胞內(nèi)多糖對S180的抑制率為30.13％～41.07％，與劑量呈正相關(guān)關(guān)系。樺褐孔菌胞外多糖的抑瘤率為23.29％～3

4、6.73％，也與劑量呈正相關(guān)關(guān)系。環(huán)磷酰胺為52.83％。三者各組分均能極顯著抑制腫瘤生長。在樺褐孔菌胞內(nèi)多糖和胞外多糖2個試驗組中，胞內(nèi)多糖的抑瘤效果較好。 與對照組相比，樺褐孔菌胞內(nèi)外多糖均可顯著或極顯著地提高S180荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)和脾指數(shù)(免疫指標(biāo))。樺褐孔菌胞內(nèi)多糖的胸腺指數(shù)為3.36±0.17～3.84±0.51，脾指數(shù)為7.64±0.63～7.97±1.02，均與劑量呈正相關(guān)關(guān)系。樺褐孔菌胞外多糖的胸腺指數(shù)為2.