β-,2--微球蛋白ELISA檢測方法的建立及其在臨床診斷中的應用研究.pdf

1、血清和尿液中β2-微球蛋白測定（β2-MG）最初應用于腎功能檢查，被認為是一種比血清肌酐更敏感的內(nèi)生物質(zhì)。近年來，隨著研究的不斷深入，β2-MG在臨床上的應用也逐步廣泛。這就需要建立一種簡便、快速、準確的測定方法。本研究利用單克隆抗體，優(yōu)化ELISA雙抗體夾心法檢測抗原的試驗條件，建立血清β2-MG的ELISA快速檢測方法，并用此方法檢測正常人和肝病、腎病、糖尿病等患者血清β2-MG含量，探索血清β2-MG含量變化在臨床診斷中的意義。

2、 結(jié)果顯示：ELISA雙抗體夾心法檢測血清β2-MG的最佳試驗條件為：單抗6E5（4.2mg/ml）1：800稀釋，酶標單抗抗7H5-HRP1：150稀釋，血清樣品不稀釋，包被條件37℃、2h、4℃過夜，封閉時間2h。用此方法檢測113例正常人和294例肝病、75例腎病和63例糖尿病患者血清β2-MG含量，經(jīng)統(tǒng)計學分析表明，各組肝病患者血清β2-MG與正常組比較，差異性極顯著（P<0.01），且β2-MG含量變化水平與顯示肝細胞的

3、損傷程度的ALT/AST水平呈正相關(guān)；各組腎病患者血清β2-MG與正常組比較，差異性極顯著（P<0.001），且腎病患者血清β2-MG的陽性率與其尿液β2-MG陽性率呈正相關(guān)；糖尿病組的血清β2-MG與正常組的比較，差異性顯著（P<0.05），且血清β2-MG的陽性率（74.6%）高于其尿液β2-MG陽性率（55.6%）；在肝病和腎病中，肝癌和腎癌的陽性率都是最高的，分別高達到78.2%和90.0%。不僅證明建立的ELISA雙抗體夾心法