T細(xì)胞在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病中的作用及抗IFN-全人抗體的功能性實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種以慢性炎癥為突出表現(xiàn)的系統(tǒng)性自身免疫病，免疫系統(tǒng)的功能紊亂是其主要病理特征。本研究通過流式細(xì)胞術(shù)（FCM）及ELISA 的方法對SLE 患者及正常對照組T 細(xì)胞亞群及其活化狀態(tài)、Treg 的數(shù)量及血漿細(xì)胞因子的水平進(jìn)行了檢測，以系統(tǒng)的評估SLE 患者中T細(xì)胞免疫應(yīng)答的功能。研究結(jié)果顯示， SLE 患者外周血中T 細(xì)胞表面CD69 和HLA-DR 的表達(dá)較正常人明顯升高，其中CD4+T 細(xì)胞中CD45RA+T

2、 細(xì)胞的比例明顯下降， CD45RA+CD45RO+T細(xì)胞的比例明顯增高，同時(shí)患者外周血CD4+CD25highTreg 的數(shù)量明顯減少；分析SLE 患者CD4+和CD8+T 細(xì)胞分泌IFN-?和IL-4 的能力，結(jié)果顯示，SLE 病人CD4+T 細(xì)胞中IL-4 分泌細(xì)胞的比例高于正常人，CD8+T 細(xì)胞中IFN-?分泌細(xì)胞的比例明顯高于正常對照組。上述結(jié)果顯示SLE 病理狀態(tài)下，T 細(xì)胞的外周動(dòng)態(tài)平衡（Homeostasis）和功能存

3、在異常，是患者體內(nèi)免疫功能紊亂的重要表現(xiàn)，并可能參與了SLE 的病理進(jìn)程。為了進(jìn)一步探討T 細(xì)胞在SLE 致病中的作用，我們利用SLE 動(dòng)物模型進(jìn)行了相關(guān)研究。首先，單次腹腔注視Pristane 后在BALB/c 及C57BL/6 小鼠中成功誘導(dǎo)出狼瘡樣病理表型，包括外周自身抗體升高、關(guān)節(jié)炎、腎炎等病理癥狀，小鼠中T 細(xì)胞表面粘附分子ICAM-1 和共刺激分子ICOS 的表達(dá)明顯增加，B 細(xì)胞表面MHC II 類分子的表達(dá)增高，小鼠腹腔

4、中CD11b+Ly6Chi(干擾素產(chǎn)生細(xì)胞)的數(shù)量明顯增加。進(jìn)一步比較Pristane 注射的正常小鼠和TCR 基因敲除小鼠中病理表型的變化，結(jié)果顯示T 細(xì)胞的缺失不會影響小鼠外周血中IgM 的水平增高，但是IgG 的水平未見升高，表明T 細(xì)胞的缺失可以造成抗體IgM 向IgG類別轉(zhuǎn)換的異常；進(jìn)一步采用過繼性轉(zhuǎn)移方法將Pristane 處理小鼠中的T 細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T 細(xì)胞缺陷小鼠后，發(fā)現(xiàn)與PBS 處理組相比，Pristane 組來源的CD

5、4+T 細(xì)胞介導(dǎo)TCRKO 小鼠血清中IgG 水平升高相對于PBS 組更加明顯，表明Pristane 誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生狼瘡樣動(dòng)物中，T 細(xì)胞在病理性自身抗體的產(chǎn)生過程中發(fā)揮著重要的作用。研究表明IFNα 和SLE 的病理病程密切相關(guān)，使其成為SLE 臨床治療中重要的候選靶點(diǎn)分子之一，通過設(shè)計(jì)分子阻斷IFNα 和其受體結(jié)合，有望起到緩解和治療SLE 的目的。本研究利用從全合成抗體庫中篩選獲得的特異性針對人干擾素huIFN-α1b 蛋白的全人抗