不同柚類中酚類物質(zhì)的檢測及差異性研究.pdf

1、柑橘是世界上種植面積最廣的水果之一，風(fēng)味獨(dú)特，營養(yǎng)價(jià)值高。酚類物質(zhì)是柑橘果實(shí)中次生代謝產(chǎn)物的一個(gè)大類，有著重要的生理活性功能，目前是國內(nèi)外關(guān)注的熱點(diǎn)之一。作為世界四大經(jīng)濟(jì)類柑橘（寬皮柑橘、甜橙、葡萄柚和柚、檸檬）之一，柚類（C.grandis(L.) Osbeck）果實(shí)以其果形碩大、果肉晶瑩脆嫩、風(fēng)味清香獨(dú)特、營養(yǎng)豐富、耐貯運(yùn)而深受眾多消費(fèi)者喜愛，僅我國就有200多個(gè)柚類品種，包括琯溪蜜柚、沙田柚、脆香甜柚、玉環(huán)柚等地方特色品種。柚廣泛

2、種植于東南各省，年產(chǎn)量90萬 t以上，是柑橘總產(chǎn)量的12.9％。本試驗(yàn)首次以我國42種柚及葡萄柚種質(zhì)為材料，建立了超高效液相色譜法分別快速測定柚及葡萄柚果實(shí)中主要酚類物質(zhì)的方法，較系統(tǒng)地研究了我國特色柚及葡萄柚果實(shí)中主要酚酸、香豆素、類黃酮等酚類物質(zhì)的組成與分布，分析比較柚及葡萄柚果實(shí)中各酚類物質(zhì)的含量差異，發(fā)現(xiàn)高酚類物質(zhì)的柚及葡萄柚種質(zhì)，旨在充實(shí)中國柚及葡萄柚功能成分?jǐn)?shù)據(jù)庫，為柚及葡萄柚酚類物質(zhì)的定量檢測與柑橘資源綜合利用提供參考，也

3、為柚及葡萄柚品種的分類、產(chǎn)地溯源、質(zhì)量控制等體系提供數(shù)據(jù)支撐。
　　主要研究結(jié)果如下：
　?。?）優(yōu)化并建立了超高效液相色譜法快速同時(shí)測定柚果中7種酚酸（原兒茶酸、對(duì)羥基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、p-香豆酸、芥子酸和阿魏酸）含量的方法，9 min內(nèi)目標(biāo)物能夠完全分離，并輔以高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）驗(yàn)證。各酚酸線性范圍為0.01～50 mg/L，線性相關(guān)系數(shù)均在0.9997以上，果肉平均回收率為90.37%～10

4、9.95%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.48%～7.12%，果皮平均回收率為90.38%～109.21%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.16%～4.98%，方法檢出限（LOD）為0.001～0.006 mg/kg（S/N=3）。
　?。?）優(yōu)化并建立了超高效液相色譜法快速同時(shí)測定柚果中11種香豆素（傘形花內(nèi)酯、濱蒿內(nèi)酯、補(bǔ)骨脂素、檸檬油素、異橙皮內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素、8-牻牛兒氧基補(bǔ)骨脂素、橙皮油素、香檸檬亭、5-牻牛兒氧基-7-甲氧基香豆素）含

5、量的方法，13 min目標(biāo)物內(nèi)能夠完全分離，并輔以超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）驗(yàn)證。各香豆素線性范圍為0.005～200 mg/L，線性相關(guān)系數(shù)均在0.9997以上，果肉平均回收率為91.25%～109.34%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.78%～5.84%，果皮平均回收率為93.62%～107.51%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.88%～5.59%，LOD為0.0003～0.02 mg/kg（S/N=3）。
　?。?）初步研究了4

6、2個(gè)中國特色柚類品種果肉、果皮中類黃酮、酚酸和香豆素的組成。類黃酮組分研究結(jié)果表明，柚皮苷是最主要的類黃酮，其次是蕓香柚皮苷、野漆樹苷和枸橘苷。紅馬敘果皮、果肉中總黃酮含量最高（果皮：91408.16 mg/kg DW，果肉：46037.21 mg/kg DW）。柚及葡萄柚中類黃酮組成與含量的變化在各品種間有類似的趨勢，且果皮中含量明顯高于果肉。對(duì)于來自不同產(chǎn)地的同一柚類品種，所含類黃酮種類基本一致，但含量有所差異。酚酸含量研究表明，對(duì)

7、羥基苯甲酸、阿魏酸、芥子酸、香草酸和p-香豆酸是主要的酚酸，紅馬敘果肉、果皮中酚酸總量最高（果肉：889.38 mg/kg DW，果皮：2126.78 mg/kg DW），42個(gè)不同柚類種質(zhì)呈現(xiàn)相似變異模式。香豆素含量研究表明，果肉以異歐前胡素、橙皮油素和香檸檬亭為主，呋喃香豆素含量高于簡單香豆素，宜安倭柚果肉中香豆素總含量最高（1039.73 mg/kg DW）。果皮以異橙皮內(nèi)酯、橙皮油素和香檸檬亭為主，簡單香豆素含量明顯高于呋喃香豆