骨髓基質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合珊瑚修復(fù)山羊腭裂骨缺損.pdf

1、目的：對(duì)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow stromal cells，BMSCs）復(fù)合天然珊瑚(natural coral，NC)修復(fù)羊腭裂骨缺損的能力進(jìn)行研究。 方法：從羊髂骨處抽取骨髓，體外分離培養(yǎng)、成骨誘導(dǎo)BMSCs，并通過(guò)酶細(xì)胞化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)鑒定BMSCs成骨活性,設(shè)非誘導(dǎo)組為實(shí)驗(yàn)對(duì)照。將第3代BMSCs接種于NC上，形成BMSCs-珊瑚復(fù)合物。1、3、7天后掃描電子顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞和材料的生物相容性，植入體

2、內(nèi)2、4周后觀(guān)察對(duì)機(jī)體有無(wú)排斥反應(yīng)和成骨情況。最后用骨髓基質(zhì)干細(xì)胞-珊瑚復(fù)合物植入山羊腭裂骨缺損中，設(shè)單純珊瑚植入組為實(shí)驗(yàn)對(duì)照，曠置組為空白對(duì)照。術(shù)后2周、1、3、6、9月動(dòng)態(tài)CT隨訪(fǎng)；術(shù)后3、6、9月，處死山羊，大體觀(guān)察裂隙修復(fù)情況；同時(shí)作硬組織切片，苦味酸－品紅染色，觀(guān)察新生骨組織結(jié)構(gòu)。 結(jié)果：成骨誘導(dǎo)21天后，BMSCs鈣結(jié)節(jié)染色，7天后堿性磷酸酶染色陽(yáng)性，免疫細(xì)胞化學(xué)顯示BSP，I型膠原表達(dá)陽(yáng)性，14天后表達(dá)增強(qiáng)；未誘導(dǎo)

3、組結(jié)果明顯弱。掃描電子顯微鏡下觀(guān)察骨髓基質(zhì)干細(xì)胞和珊瑚生物相容性良好，細(xì)胞能在支架上黏附、生長(zhǎng)、增殖、遷徙，形成網(wǎng)狀的細(xì)胞基質(zhì)和大量膠原。細(xì)胞珊瑚復(fù)合物植入體內(nèi)后對(duì)機(jī)體沒(méi)有排斥，1月后能形成初級(jí)的骨小梁。三維CT和大體觀(guān)察顯示實(shí)驗(yàn)組裂隙逐漸被修復(fù)；而對(duì)照組沒(méi)有?？辔端幔芳t染色示實(shí)驗(yàn)組術(shù)后3、6月,成骨量逐漸增多；對(duì)照組是纖維結(jié)締組織,未見(jiàn)明顯骨組織形成。術(shù)后9月，實(shí)驗(yàn)組的骨組織結(jié)構(gòu)接近正常骨。 結(jié)論：BMSCs誘導(dǎo)后具有成骨活