富集骨髓基質(zhì)干細胞復合生物材料修復犬眼眶骨缺損.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩93頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、眼眶遭受外傷、腫瘤及炎癥等侵害時易造成骨性結(jié)構(gòu)的破壞,引起眶壁骨質(zhì)缺損,導致面中部畸形、眼球位置及視功能異常。目前臨床應用的各種修復材料均存在一定缺陷,而組織工程技術為眼眶骨修復治療帶來了希望。但目前組織工程骨構(gòu)建中的細胞來源多靠體外培養(yǎng)獲得,存在耗時、安全性及經(jīng)濟耗費等問題。如何快速、安全并且有效地把骨髓血中具有成骨能力的干細胞分離濃縮,并有效的與生物支架材料復合是組織工程技術能夠大規(guī)模應用于臨床的前提條件。
   目的:

2、r>   應用紅細胞裂解技術將骨髓血中具有成骨能力的干細胞快速分離濃縮,經(jīng)自制體外干細胞-材料融合裝置與β-磷酸三鈣(β-TCP)支架材料復合,構(gòu)建組織工程骨,探討修復眼眶骨缺損的可行性。
   方法:
   1.將骨髓血經(jīng)紅細胞裂解液處理后,獲得的有核細胞行體外成骨誘導培養(yǎng),對其中的骨髓基質(zhì)干細胞(BMSCs)進行細胞形態(tài)學及成骨活性檢測,分析紅細胞裂解液對干細胞生理特性的影響。
   2.將骨髓血中通過紅細

3、胞裂解處理獲得的有核細胞,經(jīng)體外自制干細胞-材料融合裝置,與β-TCP支架材料進行體外復合,通過掃描電鏡觀察細胞在支架內(nèi)分布及貼附情況。將該細胞-材料復合體植入犬背部皮下,植入后1個月取材進行組織學檢測,分析其異位成骨能力。
   3.經(jīng)紅細胞裂解處理獲得的干細胞與β-TCP材料體外復合構(gòu)建組織工程骨,對犬眼眶壁骨缺損進行修復實驗。對未經(jīng)處理的骨髓血及紅細胞裂解液處理后的細胞懸液行有核細胞計數(shù)及堿性磷酸酶(ALP)染色陽性細胞集

4、落的計數(shù)。在術后1周、4周、12周和24周分別進行螺旋CT檢查和三維重建觀察。術后24周取材,進行大體觀察、Micro-CT檢查及組織學觀察,對結(jié)果進行統(tǒng)計分析,評價修復效果。
   結(jié)果:
   1.犬骨髓血經(jīng)紅細胞裂解液處理后,干細胞經(jīng)體外成骨誘導培養(yǎng)后,ALP、鈣結(jié)節(jié)染色呈強陽性,表達成骨標志性蛋白(OCN,OPN,BSP,Cbfal、I型膠原等),與未經(jīng)紅細胞裂解液處理的干細胞在成骨能力及成骨活性等方面無明顯差異

5、。
   2.干細胞經(jīng)自制體外干細胞-材料融合裝置與β-TCP復合2小時后,掃描電鏡觀察材料內(nèi)部有干細胞均勻分布,且細胞貼附良好。同時,構(gòu)建的組織工程骨具有良好的異位成骨能力。
   3.通過計算濃縮前后干細胞及有核細胞計數(shù),材料內(nèi)有核細胞濃度及干細胞濃度分別提高53倍及49倍;實驗組CT影像隨訪可見材料逐漸吸收并伴有新骨的形成,同時伴有骨改建的發(fā)生;Micro-CT和組織學檢查顯示實驗組新生骨與周圍眶壁已形成骨性連接,

6、實驗組有6側(cè)(75%)眼眶骨性缺損基本被完全修復,而對照組僅有一例只在缺損最大直徑形成骨性連接,統(tǒng)計結(jié)果有顯著性差別(P<0.05)。
   結(jié)論:
   1.骨髓血經(jīng)紅細胞裂解液處理后獲得的BMSCs生物活性未受影響,能夠穩(wěn)定向成骨細胞分化并保持良好成骨活性及增殖能力。
   2.自設計體外材料-干細胞復合裝置能夠快速、高效的將BMSCs與支架材料復合。
   3.經(jīng)自設計體外材料-干細胞復合裝置構(gòu)建的

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論