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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:膿毒癥(Sepsis)是由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS),多可證實(shí)有細(xì)菌或高度可疑感染灶存在。急性肺損傷(acute lung iniury,ALI)是膿毒癥常見(jiàn)的并發(fā)癥之一,重度的ALI就是急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)。ALI/ARDS是SIRS在肺部的表現(xiàn),三者不是
2、孤立、互相分割的疾病,而是嚴(yán)重?fù)p傷引起的全身性瀑布式炎癥反應(yīng)發(fā)展過(guò)程的不同階段。本研究采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(cecal ligation and puncture, CLP)致膿毒癥肺損傷模型,通過(guò)觀察鹽酸戊乙奎醚(penehyclidine hydrochloride,PHC)對(duì)相關(guān)炎癥介質(zhì)的調(diào)節(jié),并結(jié)合肺組織病理學(xué)變化,探討鹽酸戊乙奎醚對(duì)膿毒癥肺損傷的保護(hù)作用,為臨床治療提供理論依據(jù)。
方法:采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)
3、復(fù)制膿毒癥肺損傷模型。健康雄性Wistar大鼠36只,隨機(jī)分為3組,每組12只。①假手術(shù)組(Sham組)打開(kāi)腹腔后僅暴露盲腸,不作結(jié)扎穿孔處理。②膿毒癥組(CLP組)行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)。③鹽酸戊乙奎醚治療組(PHC組)行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)后腹腔注射鹽酸戊乙奎醚2mg/kg,假手術(shù)組和膿毒癥組則腹腔給予等量生理鹽水。三組術(shù)后均皮下注射生理鹽水30~40ml/kg補(bǔ)充術(shù)中體液丟失并抗休克。觀察各組大鼠術(shù)后一般情況變化。術(shù)后12h,經(jīng)頸動(dòng)脈抽血留取
4、血標(biāo)本,之后放血處死大鼠,并迅速留取肺組織標(biāo)本。采集血標(biāo)本后測(cè)定動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)、動(dòng)脈血二氧化碳分壓(PaCO2)、pH值。采用放射免疫分析法測(cè)定大鼠血清TNF-α、IL-6等炎性細(xì)胞因子的水平。采集肺組織標(biāo)本后,在光鏡和透射電鏡下觀察肺組織的病理形態(tài)學(xué)變化。并取右肺下葉,濾紙吸干表面水分后稱(chēng)濕重,再置于80℃恒溫箱,烘烤48h至恒重后稱(chēng)干重,計(jì)算肺濕/干重比(W/D)。
結(jié)果:
1、術(shù)后一般情況觀察
5、:CLP組大鼠病態(tài)明顯,蜷縮,活動(dòng)減少,不飲水,不再合群取暖,豎毛,呼吸急促,分泌物由鼻腔溢出,眼角出現(xiàn)滲出物等。剖腹可見(jiàn)渾濁膿血性滲液、惡臭、腸管水腫、空腸腸管脹氣,腸粘連等。Sham組大鼠麻醉清醒后活動(dòng)基本如常。PHC組大鼠術(shù)后表現(xiàn)較輕。
2、血?dú)夥治鲎兓号cSham相比,CLP組大鼠動(dòng)脈血PaO2、pH顯著降低(P<0.05),PaCO2顯著升高(P<0.05);PHC組大鼠動(dòng)脈血PaO2、pH顯著降低(P<0.05
6、),PaCO2顯著升高(P<0.05);PHC組與CLP組相比PaO2、pH顯著升高(P<0.05),PaCO2顯著降低(P<0.05)。
3、光鏡結(jié)果顯示:Sham組肺泡結(jié)構(gòu)完整,肺泡隔均勻一致,可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞,肺泡腔清晰,無(wú)滲出液;CLP組肺泡隔增厚,肺泡結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,部分肺泡腔內(nèi)見(jiàn)滲出、水腫、出血,肺間質(zhì)可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);PHC組較CLP組明顯減輕但較假手術(shù)組重。
4、電鏡結(jié)果顯示:Sham組肺微
7、血管內(nèi)皮細(xì)胞及基底膜形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,細(xì)胞連接緊密,內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)吞飲小泡。Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)正常,板層小體結(jié)構(gòu)清晰。微絨毛排列整齊。CLP組肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞嚴(yán)重腫脹基底膜缺損、疏松、不清晰,毛細(xì)血管壁電子密度降低明顯。Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)線粒體水腫腫脹,嵴斷裂或消失。微絨毛排列完全脫落。PHC組肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)基本正常,基底膜較完整。Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常,微絨毛排列較整齊。
5、各組大鼠肺組織濕干重比(W/D
8、)變化:與Sham相比,CLP組肺組織W/D顯著增加(5.4064±0.2353 vs4.3976±0.2037,P<0.05); PHC組肺組織W/D也顯著增加(4.7162±0.2356 vs4.3976±0.2037,P<0.05);與CLP組相比,PHC組肺組織W/D顯著減小(4.7162±0.2356 vs5.4064±0.2353,P<0.05)。
6、各組大鼠12h血清TNF-α、IL-6水平的變化:Sham
9、組血清TNF-α水平顯著低于CLP組和PHC組(0.8352±0.044 vs1.6699±0.0630,P<0.01;0.8352±0.044 vs1.2574±0.0683,P<0.01);與CLP組相比,經(jīng)PHC治療后的大鼠血清中TNF-α水平下降(1.2574±0.0683 vs1.6699±0.0630,P<0.0);Sham組血清IL-6水平顯著低于CLP組和PHC組(116.2510±6.7318vs156.1840±8.
10、7588,P<0.01;116.2510±6.7318 vs119.500±11.4559,P<0.01);與CLP組相比,經(jīng)PHC治療后的大鼠血清中IL-6水平下降(119.500±11.4559 vs156.1840±8.7588,P<0.01)
結(jié)論:
1、CLP法能夠成功復(fù)制由腹腔感染導(dǎo)致的大鼠膿毒癥模型。
2、鹽酸戊乙奎醚能夠降低血清TNF-α、IL-6水平,對(duì)膿毒癥肺損傷有明顯保護(hù)作
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