鹽酸戊乙奎醚對(duì)膿毒癥大鼠肺臟的保護(hù)作用.pdf

1、目的：膿毒癥（Sepsis）是由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征（Systemic inflammatory response syndrome，SIRS），多可證實(shí)有細(xì)菌或高度可疑感染灶存在。急性肺損傷（acute lung iniury，ALI）是膿毒癥常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，重度的ALI就是急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）。ALI/ARDS是SIRS在肺部的表現(xiàn)，三者不是

2、孤立、互相分割的疾病，而是嚴(yán)重?fù)p傷引起的全身性瀑布式炎癥反應(yīng)發(fā)展過(guò)程的不同階段。本研究采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)（cecal ligation and puncture， CLP）致膿毒癥肺損傷模型，通過(guò)觀察鹽酸戊乙奎醚（penehyclidine hydrochloride，PHC）對(duì)相關(guān)炎癥介質(zhì)的調(diào)節(jié)，并結(jié)合肺組織病理學(xué)變化，探討鹽酸戊乙奎醚對(duì)膿毒癥肺損傷的保護(hù)作用，為臨床治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)（CLP）

3、復(fù)制膿毒癥肺損傷模型。健康雄性Wistar大鼠36只，隨機(jī)分為3組，每組12只。①假手術(shù)組（Sham組）打開(kāi)腹腔后僅暴露盲腸，不作結(jié)扎穿孔處理。②膿毒癥組（CLP組）行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)。③鹽酸戊乙奎醚治療組（PHC組）行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)后腹腔注射鹽酸戊乙奎醚2mg/kg，假手術(shù)組和膿毒癥組則腹腔給予等量生理鹽水。三組術(shù)后均皮下注射生理鹽水30～40ml/kg補(bǔ)充術(shù)中體液丟失并抗休克。觀察各組大鼠術(shù)后一般情況變化。術(shù)后12h，經(jīng)頸動(dòng)脈抽血留取

4、血標(biāo)本，之后放血處死大鼠，并迅速留取肺組織標(biāo)本。采集血標(biāo)本后測(cè)定動(dòng)脈血氧分壓（PaO2）、動(dòng)脈血二氧化碳分壓（PaCO2）、pH值。采用放射免疫分析法測(cè)定大鼠血清TNF-α、IL-6等炎性細(xì)胞因子的水平。采集肺組織標(biāo)本后，在光鏡和透射電鏡下觀察肺組織的病理形態(tài)學(xué)變化。并取右肺下葉，濾紙吸干表面水分后稱(chēng)濕重，再置于80℃恒溫箱，烘烤48h至恒重后稱(chēng)干重，計(jì)算肺濕/干重比（W/D）。
　　 結(jié)果：
　　 1、術(shù)后一般情況觀察

5、：CLP組大鼠病態(tài)明顯，蜷縮，活動(dòng)減少，不飲水，不再合群取暖，豎毛，呼吸急促，分泌物由鼻腔溢出，眼角出現(xiàn)滲出物等。剖腹可見(jiàn)渾濁膿血性滲液、惡臭、腸管水腫、空腸腸管脹氣，腸粘連等。Sham組大鼠麻醉清醒后活動(dòng)基本如常。PHC組大鼠術(shù)后表現(xiàn)較輕。
　　 2、血?dú)夥治鲎兓号cSham相比，CLP組大鼠動(dòng)脈血PaO2、pH顯著降低（P<0.05），PaCO2顯著升高（P<0.05）；PHC組大鼠動(dòng)脈血PaO2、pH顯著降低（P<0.05

6、），PaCO2顯著升高（P<0.05）；PHC組與CLP組相比PaO2、pH顯著升高（P<0.05），PaCO2顯著降低（P<0.05）。
　　 3、光鏡結(jié)果顯示：Sham組肺泡結(jié)構(gòu)完整，肺泡隔均勻一致，可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞，肺泡腔清晰，無(wú)滲出液；CLP組肺泡隔增厚，肺泡結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重，部分肺泡腔內(nèi)見(jiàn)滲出、水腫、出血，肺間質(zhì)可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；PHC組較CLP組明顯減輕但較假手術(shù)組重。
　　 4、電鏡結(jié)果顯示：Sham組肺微

7、血管內(nèi)皮細(xì)胞及基底膜形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，細(xì)胞連接緊密，內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)吞飲小泡。Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)正常，板層小體結(jié)構(gòu)清晰。微絨毛排列整齊。CLP組肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞嚴(yán)重腫脹基底膜缺損、疏松、不清晰，毛細(xì)血管壁電子密度降低明顯。Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)線粒體水腫腫脹，嵴斷裂或消失。微絨毛排列完全脫落。PHC組肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)基本正常，基底膜較完整。Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，微絨毛排列較整齊。
　　 5、各組大鼠肺組織濕干重比（W/D

8、）變化：與Sham相比，CLP組肺組織W/D顯著增加（5.4064±0.2353 vs4.3976±0.2037，P<0.05）； PHC組肺組織W/D也顯著增加（4.7162±0.2356 vs4.3976±0.2037，P<0.05）；與CLP組相比，PHC組肺組織W/D顯著減小（4.7162±0.2356 vs5.4064±0.2353，P<0.05）。
　　 6、各組大鼠12h血清TNF-α、IL-6水平的變化：Sham

9、組血清TNF-α水平顯著低于CLP組和PHC組（0.8352±0.044 vs1.6699±0.0630，P<0.01；0.8352±0.044 vs1.2574±0.0683，P<0.01）；與CLP組相比，經(jīng)PHC治療后的大鼠血清中TNF-α水平下降（1.2574±0.0683 vs1.6699±0.0630，P<0.0）；Sham組血清IL-6水平顯著低于CLP組和PHC組（116.2510±6.7318vs156.1840±8.

10、7588，P<0.01；116.2510±6.7318 vs119.500±11.4559，P<0.01）；與CLP組相比，經(jīng)PHC治療后的大鼠血清中IL-6水平下降（119.500±11.4559 vs156.1840±8.7588，P<0.01）
　　 結(jié)論：
　　 1、CLP法能夠成功復(fù)制由腹腔感染導(dǎo)致的大鼠膿毒癥模型。
　　 2、鹽酸戊乙奎醚能夠降低血清TNF-α、IL-6水平，對(duì)膿毒癥肺損傷有明顯保護(hù)作