陡脈沖電場(chǎng)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及機(jī)理的研究.pdf

1、惡性腫瘤是一類嚴(yán)重威脅人類健康和生命的疾病,其基本特征就是癌細(xì)胞失控的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。盡管目前已有多種癌癥的治療方法但是都不理想,國(guó)內(nèi)外的專家對(duì)此進(jìn)行了深入的研究和探討,提出了一種腫瘤治療的新方法,可以降低放、化療給病人帶來(lái)的痛苦,即利用高強(qiáng)度的脈沖電場(chǎng)刺激促使腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡從而達(dá)到治療腫瘤的效果,這對(duì)腫瘤的治療有理論和實(shí)際的意義。本文的主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1.利用Annexin V-FITC凋亡試劑盒和流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定正常細(xì)胞

2、HL-7702和腫瘤細(xì)胞SMMC-7721在不同的參數(shù)的脈沖電場(chǎng)作用下的凋亡情況。結(jié)果顯示,脈寬1.8μs,強(qiáng)度超過(guò)200V/cm以上的脈沖電場(chǎng)可以誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡,正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞隨電場(chǎng)強(qiáng)度的增加凋亡程度增大,同參數(shù)下腫瘤細(xì)胞的凋亡大于正常細(xì)胞。2.利用DNA Ladder試劑盒測(cè)定腫瘤細(xì)胞在不同參數(shù)電場(chǎng)作用下,DNA的變化情況。結(jié)果顯示,隨電場(chǎng)強(qiáng)度的增加腫瘤細(xì)胞DNA斷裂為更小的片段。3.利用Fluo-3染色,激光共聚焦顯微鏡實(shí)時(shí)

3、測(cè)定脈沖電場(chǎng)作用下細(xì)胞內(nèi)鈣振蕩變化。結(jié)果顯示,脈寬1.8μs的電場(chǎng)作用下,腫瘤細(xì)胞胞內(nèi)鈣離子濃度隨電場(chǎng)強(qiáng)度的增加降低幅度增大;同樣參數(shù)的電場(chǎng)作用,有胞外鈣條件下胞內(nèi)鈣離子濃度的下降程度低于無(wú)胞外鈣條件下胞內(nèi)鈣離子濃度的下降程度。4.利用羅丹明123染色,激光共聚焦顯微鏡實(shí)時(shí)測(cè)定脈沖電場(chǎng)作用下細(xì)胞線粒體膜電位變化。結(jié)果顯示,脈寬1.8μs的電場(chǎng)作用下,腫瘤細(xì)胞線粒體膜電位隨電場(chǎng)強(qiáng)度增大降低幅度增大。5.納秒級(jí)脈沖電場(chǎng)作用下,腫瘤細(xì)胞凋亡、

4、鈣振蕩和線粒體膜電位的變化情況。結(jié)果顯示,度600V/cm、脈寬120ns的電場(chǎng)作用下,腫瘤細(xì)胞無(wú)明顯凋亡;細(xì)胞外有鈣條件下,胞內(nèi)鈣離子濃度略有下降。同脈寬1.8μs的電場(chǎng)相比強(qiáng),細(xì)胞外無(wú)鈣條件下,該電場(chǎng)可使腫瘤細(xì)胞胞內(nèi)鈣離子濃度降低幅度更大;線粒體膜電位的降低幅度更大。參考國(guó)內(nèi)、外的相關(guān)研究成果,根據(jù)已有的理論和知識(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)果進(jìn)行分析和討論得出:脈沖電場(chǎng)可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡;脈沖電場(chǎng)作用下腫瘤細(xì)胞的凋亡可能是由胞內(nèi)鈣離子濃度降低